Kemirgen Modellerinde Orta Serebral Arter Oklüzyonu Öncesi Serebral Kan Akışının İzlenmesi için Bir Lazer Doppler Probunun Periorbital Yerleştirilmesi

Özet

Burada, geçici MCA oklüzyonu sırasında kan akışını değerlendirmek için lazer Doppler probunun, sıçanlar ve fareler için uygun bir periorbital konum olan orta serebral arterin (MCA) distal bölgesi üzerine kafatasına yerleştirilmesini içeren minimal invaziv bir cerrahi prosedür gösterilmektedir.

Özet

Orta serebral arter tıkanıklığı (MCAO), kemirgenlerde iskemik inmenin preklinik modellemesi için altın standart yöntemdir. Bununla birlikte, başarılı oklüzyon en yetenekli cerrahi eller tarafından bile garanti edilmez. Hatalar öncelikle filament doğru derinliğe yerleştirilmediğinde ortaya çıkar ve ölüme neden olabilecek enfarktüs veya damar delinmesi durumlarını içerir. Lazer Doppler akış metrisi (LDF), MCAO prosedürü sırasında bölgesel serebral kan akışı (CBF) hakkında gerçek zamanlı geri bildirim sağlayan güvenilir bir tekniktir. Burada, hem farelerde hem de sıçanlarda CBF ölçümü için bir lazer Doppler probunun periorbital yerleştirilmesi için hızlı bir teknik gösteriyoruz. Gerekçemiz, LDF uygulamasını basitleştirmek ve daha iyi cerrahi güvenilirlik için yaygın kullanımı teşvik etmekti. Teknik, kafatası inceltme ve özel ekipman ihtiyacını ortadan kaldırır, dorsal yerleştirme yerine periorbital bölgeye yerleştirme ile verimliliği ve benimseme kolaylığını artırır. Burada açıklanan protokol, cerrahi öncesi hazırlıkları, periorbital Doppler prob yerleştirmeyi ve ameliyat sonrası bakımı kapsar. Temsili sonuçlar, komplikasyonlara yol açan başarısız filament yerleştirme örnekleriyle birlikte, başarılı MCAO ameliyatlarını gösteren temsili LDF izlemelerinin yanı sıra prosedürel unsurların görsel tasvirlerini içerir. Protokol, uygun filament yerleşimini onaylamada LDF'yi gösterir ve alternatif yöntemlere kıyasla basitleştirilmiş bir prosedür sunar.

Giriş

Orta serebral arter oklüzyonu (MCAO) yöntemi, 1986'da sıçanlara uygulanmak üzere bilim camiasına^{tanıtıldığından beri kemirgenlerde yaygın} olarak kullanılmaktadır 1 1990'da açıklanan Longa adaptasyonu² ve hemen ardından^fareler için adaptasyonlar 3. Longa'nın yayınında açıklanmamış olmasına rağmen, filament yerleşimini doğrulamak için lazer Doppler akış ölçer (LDF) sinyalinin kullanılması kısa süre sonra literatürde tanımlanmıştır⁴. MCAO prosedürü sırasında LDF istihdamı literatürde belirgin bir şekilde yer almaktadır, ancak mevcut İnme Klini....

Protokol

Bu protokolü göstermek için yetişkin fareler ve sıçanlar kullanıldı (25 g, C57BL / 6J, Jackson Laboratories; 250 g, Sprague Dawley, Envigo). Hayvan işleme ve deneysel işlemler, Arizona Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi'ne, ulusal yasalara uygun olarak ve laboratuvar hayvanı bakımı ilkelerine göre ve onay ile gerçekleştirilmiştir¹¹. Sıçanlar ve fareler, yiyecek ve su ad libitum ile 12 saatlik bir aydınlık / karanlık programı (7-7 pm) ile barındırıldı.

1. Ameliyat öncesi hazırlık

NOT: Tipik olarak, bir kemirgende....

Tartışmalar

MCAO, kemirgenlerde serebral arter oklüzyonu ve reperfüzyonunu modellemek için altın standart prosedürdür ve insan inme patofizyolojisini taklit etmek için kemirgenlerde fokal iskemi indüksiyonunu sağlayan klinik öncesi inme araştırmalarının temel taşı olmuştur. Cerrahlar arası ve hatta cerrah içi önemli değişkenliğe sahip titiz bir cerrahi prosedürdür. LDF uygulamasının değişkenliği azalttığına dair bir kanıt bulunmamakla birlikte, bazı tasarımlarda b.......

Malzemeler

Name	Company	Catalog Number	Comments
curved spring scissors	Castroviejo	1501710
forceps #5	Fine science tools	11250-20
forceps #5/45	Fine science tools	1151-35
Forcepts Cautery tool	Conmed	M18019-01
Laboratory tape	Fisherbrand Labeling Tape	15-950
Laser Doppler Monitor	Moore Instruments	MOORVMS-LDF
LDF software	Perisoft for Windows or moorSOFT	NA
Mouse clippers	Philips Norelco	MG7910
Periflux System 4000, probe 407	Perimed	equipment no longer available
plastic wrap	Glad	press n seal
Rat clippers	oster	A5 or similar
Small rodent anesthesia	JD Medical	custom order
small scissors	excelta	362 Sissors or similar
Temperature monitor system with probe	Physitemp	TCAT-2AC Controller