Electroporation-Based DNA Plasmids Delivery to Induce In Vivo Mutations in the Mouse

Masanın üzerine kare bir parça parafin film yerleştirerek ve elektrot jelini filmin üzerine sıkarak elektroporasyon bazlı DNA plazma dağıtımına başlayın. Ardından, elektrot kanatlarını tamamen kaplamak için her bir kürek üzerine bol miktarda elektrot jeli uygulayın. Ardından, plazmit DNA karışımı ile mikro enjekte edilen yavruyu, parmakları başın arkasında tutarak baskın olmayan elde tutun.

Yavrunun kafasını elektroporasyon için konumlandırmak için, bir parmağınızı bir sonraki sırt tarafına, başın arkasına hafifçe kaydırın ve pozitif elektrotu ventrikülün hedeflendiği başın dışına yerleştirin. Elektrodu yavrunun gözünün üzerine yerleştirin ve elektrot küreklerini yavrunun başının rostral kısmına hafifçe sıkın. Elektroporasyonu başlatmak için elektrot ayak pedalına basın.

Her darbede, elektrot kanatlarını saat yönünün tersine hafifçe döndürün, böylece pozitif kanatçık başın tepesine doğru hareket eder. Son darbeden sonra kürekleri çıkarın ve bir kenara koyun. Fareler, elektroporasyondan beş ay sonra can çekişiyordu ve raportör protein ve histolojik analiz yoluyla tam tümör büyümesi tespit edildi.