Yabani soya fasulyesi, S.Americanum ve yerel balkabağı çeşitlerini toplayarak başlayın. Tohumları vermikülit içinde bir santimetre derinlikte ekin ve iyice sulayın. Bunları yaklaşık% 70 bağıl nemde bir büyüme odasında yetiştirin.
A.rhizogenes suşu K599'u 80 santigrat derece dondurucudan çıkarın ve 48 saat boyunca 28 santigrat derecede katı bir LB ortamında etkinleştirin. Daha sonra tek bir K599 suşu klonu seçin ve 12 saat boyunca LB ortamı içeren bir mililitre sıvı antibiyotik içinde kültürleyin. 500 mikrolitre bakteri süspansiyonunu LB ortamı içeren katı bir antibiyotik üzerine eşit şekilde yayın ve 24 saat boyunca 28 santigrat derecede inkübe edin.
Yedi gün sonra, fide kotiledonları açıldığında, hipokotilin yaklaşık 0,5 ila bir santimetresini kesmek için sterilize edilmiş keskin bir neşter kullanın. Birincil kökü ve hipokotilin bir kısmını atın. Hipokotil insizyonu K599 bakterileri ile kaplayın.
Fideleri nemli vermikülitte dikin ve A.rhizogenes aracılı tüylü kök dönüşümü kullanarak her türden 30 bitkiyi enfekte edin. Daha sonra bitkileri çeyrek mukavemetli Gamborg B5 bazik ortamında beş mililitre yeniden süspansiyon K599 bakteri süspansiyonu ile sulayın. Saksıları şeffaf bir plastik torba ile örtün ve bir büyüme odasına yerleştirin.
Bitkileri aşılamadan yaklaşık 12 gün sonra büyütün. Bu sırada, kesi bölgesinde tipik olarak iki ila beş santimetre uzunluğa ulaşan yeni tüylü kökler oluşturulmalıdır. 540 nanometrede yeşil uyarma ışığı ve 600 nanometrede emisyon ile bir CAMI lüminesans görüntüleme sistemi kullanarak, raportör gen DsRed2'nin ekspresyonunu tespit edin.
Yabani soya fasulyesi, S.Americanum ve balkabağının kompozit bitkilerinin kökleri doğal ve yeşil uyarma ışığı altında görselleştirilir.
