Fareyi uyuşturduktan sonra, farenin yeterince uyuşturulup uyuşturulmadığını kontrol etmek için farenin pençelerinden birini hafifçe sıkıştırın. Farenin gözlerini genişletmek için% 1 tropikamid oftalmik solüsyon damlası uygulayın ve 30 saniye bekleyin. Ardından göz hareketini ve göz kırpmayı azaltmak için her iki göze %0,5 proparakain hidroklorür damlaları uygulayın, ardından kayganlaştırıcı göz jeli damlaları uygulayın ve fareyi bir ısıtma suyu yastığına yerleştirin.
Eşit hacimde indosiyanin yeşili veya ICG ve floresein boyası içeren bir boya karışımı hazırlayın. Farenin arka bacaklarının yakınındaki sol alt kadrana intraperitoneal enjeksiyon yoluyla 250 mikrolitre karışım enjekte edin ve organ delinmesini önlemek için cilde paralel olarak konumlandırın. Şırınga kapağına kan girmediğinden emin olarak pistonu dikkatlice geri çekin.
Boyayı sabit bir hızda kademeli olarak enjekte ederek devam edin. Ardından, fareyi görüntüleme platformunun ısıtma yastığına yerleştirin. Farenin gövdesinin konumunu kameraya göre 45 derecelik bir açıyla ayarlayın ve başını hafifçe aşağı doğru eğin.
Kayganlaştırıcı göz damlası veya jel tabakasını çıkarmak için pamuklu çubuk kullanarak görüntülenecek gözü nazikçe silin. Kamerayı farenin gözüne doğru kaydırın ve çekim modülünden FA kanalını seçin. Farenin kafasını, optik sinir ekranda ortalanacak şekilde düzenleyin ve lazer tarama oftalmoskopunu eğme ihtiyacını ortadan kaldırın.
Şimdi, alım modülündeki ICGA kanalına geçin. Göz, görüntüleme yazılımında tüm ekranı kapladığında, görüntü duyarlılığı ayarlamaları için çekim modülündeki yuvarlak siyah düğmeyi çevirin. Odakta ince ayar yapmak için oftalmoskopun düğmesini kullanın.
Ardından, görüntüyü normalleştirmek için çekim modülündeki yuvarlak siyah düğmeye basın. Normalleştirmeden sonra, görüntüyü kaydetmek için dokunmatik ekran panelindeki AL düğmesine tıklayın. Çekim modülünü kullanarak FA kanalına geçin ve koroidal neovaskülarizasyon veya CNV lezyonunun sızıntısını yakalamak için daha önce gösterildiği gibi her görüntünün hem hassasiyetini hem de odağını ayarlayın.
Ardından, enjeksiyondan üç ila dört dakika sonra ICGA ve FA'nın erken aşaması için görüntüler yakalayın. Gerekli tüm görüntüler yakalandıktan sonra, farenin gözüne bir jel kayganlaştırıcı veya merhem sürün. Kılcal CNV, genç farelerde CNV lezyonlarına hakimdir.
Buna karşılık, yaşlı fareler, büyük kalibreli damarlar, vasküler döngüler ve anastomoz bağlantıları ile karakterize edilen arteriyolar CNV sergiler. Hem genç hem de yaşlı fareler, genç farelerin ICGA görüntülerinde retina damar sisteminin net görünürlüğünü FA.In, retina damar sistemi görünmez ve koroid damarları soluk görünür. Yaşlı farelerin ICGA görüntülerinde, koroid damarları soluk görünürken kısmi retinal damar sistemi gözlenebilir.
Yaşlı farelerde arteriolar CNV, genç farelerde kılcal CNV'ye kıyasla daha büyük bir CNV boyutu ve önemli ölçüde daha fazla sızıntı sergiler.
