Anestezi uygulanan sıçana mililitre başına 0.3 miligram buprenorfin subkutan olarak uygulanarak başlayın. Fareyi stereotaksik çerçeveye monte edin. Ardından, kürkü kafadan tıraş etmek için bir tıraş bıçağı kullanın.
Steril pamuklu çubuklar kullanarak, her seferinde üç ila beş saniye boyunca farklı yönlere sürtünerek, cildi üç alternatif tur% 10 povidon iyot ve alkol ile dezenfekte edin. Kuruluğu önlemek için göz merhemi sürün. Şimdi, steril bir neşter kullanarak başın orta hattı boyunca iki santimetrelik bir kesi yapın, ardından steril bezler ve salin kullanarak kafatasını titizlikle temizleyin.
Stereotaksik cihaza monte edilmiş 10 mikrolitrelik bir Hamilton şırınga iğnesi kullanarak bregmayı tanımlayın ve 00 olarak ayarlayın. Cihazı ön, arka ve yan koordinatları hareket ettirin. Bir diş matkabı kullanarak bir milimetre çapak deliği oluşturun.
10 mikrolitrelik Hamilton şırıngasına dört mikrolitre serbest bırakma kokteyli yükleyin, ardından dura ile temas etmek için iğneyi keskin veya konik bir kenarla dikkatlice indirin. İğneyi istenen 3,5 milimetre derinliğe kadar yerleştirin. Dakikada bir mikrolitre oranında iki mikrolitre serbest bırakma kokteyli demleyin.
İğneyi iki dakika daha yerinde bırakın, ardından serbest bırakma kokteylinin yüzeye çıkmasını önlemek için yavaşça geri alın. Kesiyi 5/0 naylon kullanarak dikin ve dikişli bölgeyi antiseptik ile temizleyin. Daha sonra hayvanı operasyon sonrası izleme alanına aktarın.
Üç mikrolitreden fazla serbest bırakma kokteylinin enjeksiyonu, spesifik olmayan mekanik yaralanmalara yol açtı. Kokteylin iki mikrolitresinin enjeksiyonu, sekiz ay sonra bile görülebilen doublecortin immüno-pozitif kümelerin ortaya çıkmasına neden oldu. Beyin immün boyama, ependimal tabakada sadece enjeksiyon seviyesine yakın denudasyon bölgeleri ortaya çıkardı.
Subependimal zonun daha arka ve daha ön bölgelerinde ependimal tabaka pertürbasyonlarında kademeli bir azalma görüldü.
