Zebra balığı baş desteği için omega şeklinde bir kafa çubuğu hazırlamak için, üç eksenli bir mikro manipülatöre bir parça yağ bazlı modelleme kili takın. Ardından kafa çubuğunun bir kolunu kile sokun ve kafa çubuğunu yatay olarak yönlendirin. Ameliyat sırasında balığın vücudunu yerinde tutmak için topu hazırlayın.
Kafatasının bağlanma bölgelerindeki fazla deriyi ve suyu çıkarmak için, bir kağıt havluyu üç santimetre kareye keserek dört doku çubuğu hazırlayın. Ardından, tüp benzeri bir yapı oluşturmak için kağıt kareleri köşegenleri boyunca katlayın ve tüpün uçlarını ince bir noktaya bükün. Balıkları %0.03 TMS ile uyuşturduktan sonra, işlem boyunca sedasyonu korumak için %0.01TMS ile şırınga perfüzyonu gerçekleştirin.
Balıkları kuyruğun ucundan başlayarak solungaçtan solungaçlara kadar yaklaşık bir milimetre kaudal kadar nemli kağıt mendile sarın. Ardından, balığı kuyruğun ucundan solungaçlara kadar yaklaşık iki milimetre kaudal kadar kaplayan kağıt mendilin etrafına uzunlamasına bir yarık ile yumuşak bir plastik boru sarın. Kağıt havluyu borunun etrafına sarın.
Ardından, plastik bir transfer pipetinin ampulünden kesilmiş yumuşak bir plastik tüpü kağıt havlunun etrafına sarın. Sarılmış balığı topa yükleyin. Daha sonra, bir neşter kullanarak, bağlanma yerlerini kaplayan cildi, kafatasının iki üçgen bölgesini serebelluma rostrolateral ve solungaçların üzerinde çıkarın.
Ardından, bağlantı bölgelerini kurutmak ve kalan cildi temizlemek için doku çubukları kullanın. 10 mikrolitrelik bir pipet ucu kullanarak, her bağlantı bölgesinin ortasına bir damla doku yapıştırıcısı uygulayın. Balık gövdesini dik konuma getirin ve baş çubuğunu biraz yukarıya ve bağlantı yerlerine kaudal olarak yerleştirin.
Daha sonra, küçük bir kaşık polimeri dört damla hızlı monomer ve bir damla katalizör beş ile karıştırarak diş çimentosu hazırlayın. Karışımı 15 saniye boyunca eşit şekilde karıştırın. Karıştırdıktan hemen sonra, çimentoyu bağlantı bölgelerine ve bölgeler arasındaki bölgeye uygulamak için bir mikropipet ve 10 mikrolitrelik bir pipet ucu kullanın.
Ardından bir mikro manipülatör kullanarak, kafa çubuğunu çimentoya hafifçe bastırın. Baş çubuğunu kalan çimento ile örtün ve çimentonun sertleşmesi için 12 dakika bekleyin. Daha sonra, kalsiyum görüntüleme için ön beyne optik erişimi iyileştirmek için, telensefalonun üzerindeki cildi çıkarmak için bir neşter kullanın.
Sertleştikten sonra kili baş çubuğundan çıkarın. Ardından, mikro manipülatör için bir balık yükleme modülü hazırlayın. Ardından kapsülün tamamını toptan balık yükleme modülündeki zift ayarlayıcıya aktarın.
Mikro manipülatörü kullanarak, balığı baş çubuğunun metal direklerinin üzerine yerleştirilmiş olarak konumlandırın. Balığın eğim açısını biraz arttırın. Kafa çubuğunu metal direklere sabitlemek için ultraviyole kürlenebilir yapıştırıcı uygulayın.
Ardından balığı kapsülden çıkarın ve baş aşamasını yarı altıgen tankın içindeki taban plakasına kilitleyin. Ameliyattan sonra, anesteziden kurtulmak için hayvanı akvaryum suyuna daldırın.
