Çalışma yüzeyine temiz bir tezgah pedi veya örtü malzemesi yerleştirerek başlayın. Bir izofluran buharlaştırıcının burun konisini yüzeye bantlayın ve deneyciden uzağa baktığından emin olun. Beş mikrolitrelik bir cam şırıngaya 10 milimetre uzunluğunda, 27 gauge ve 45 derecelik eğimli bir iğne takın.
İğneye silastik boru ekleyin, ucun 3,5 milimetresinin çıkıntı yapmasına izin verin ve boruyu laboratuvar bandı ile şırınga gövdesine sabitleyin. Daha sonra, başlangıçta gerekenden daha fazlasını çekerek cam şırıngaya üç mikrolitre enjeksiyon ortamı çekin, ardından sadece üç mikrolitre kalana kadar fazlalığı çıkarın. Geri sayım modunda bir laboratuvar zamanlayıcısı başlatın ve enjeksiyonlar sırasında kolay görüntüleme için konumlandırın.
Bir iğneyi yanal ve kaudal olarak hareket ettirme alıştırması yaptıktan sonra, enjeksiyon bölgesini önce iyotla ve ardından alkolle üç kez temizleyerek anestezi uygulanmış fareyi enjeksiyona hazırlayın. Kraniyotomi bölgesinden geçirerek 18 gauge iğne kullanarak enjeksiyon bölgesini belirleyin. Fareyi enjekte etmek için önce farenin başını baskın olmayan elinizle sıkıca tutun.
Kafayı çalışma yüzeyine düz bir şekilde yerleştirin. Ardından, cam şırınganın iğnesini, boru farenin derisine dayanana kadar kafatasındaki delikten geçirin. Şırıngayı koronal ve sagital düzlemlere dikey olarak tutarak, ortamı bir dakika boyunca yavaşça enjekte edin.
Geri akışı en aza indirmek için şırıngayı ve iğneyi bir dakika daha tutun. Ardından iğneyi yavaşça geri çekin. Fareyi burun konisinden çıkarın.
Steril gazlı bez kullanarak enjeksiyon bölgesindeki kanı temizleyin ve fareyi uyanana kadar bir kafes ısıtıcısı üzerinde bir kafese yerleştirin. Gaz anestezisine kısa süre maruz kalma ve tek başına ventriküler sisteme üç mikrolitre sıvı enjeksiyonu, pulsatil luteinize edici hormon sekresyonunu değiştirmedi. Enjeksiyon yolları nöral dokuda görüldü ve lateral ventrikül ile kesişti.
