Nitroselüloz membrandan özdeş basılı mikrodizileri keserek ve bunları problama için uygun bir kaba yerleştirerek başlayın. Spesifik olmayan bağlanmayı azaltmak için, mikrodizilere MP-TBST engelleme tamponu ekleyin ve dönen bir çalkalayıcı üzerinde bir saat inkübe edin. İnkübasyondan sonra, tamponu taze MP-TBST ile değiştirin.
Dizileri monoklonal antikorlar ve MP-TBST ile dönen bir çalkalayıcı üzerinde iki saat inkübe edin. İnkübasyondan sonra moleküler prob çözeltisini çıkarın. Dizileri tamamen temiz TBST'ye daldırın.
Artık prob çözeltisini çıkarmak için tamponu hemen yeni bir hacimle değiştirin. Dizileri beş dakika boyunca dönen bir çalkalayıcıya yerleştirin. TBST'yi yeni bir tampon hacmiyle değiştirin ve dizileri beş dakika daha çalkalayıcıya yerleştirin.
Daha sonra, dizileri dönen bir çalkalayıcı üzerinde iki saat boyunca alkalin fosfataz konjuge antikorlarla inkübe edin. İnkübasyon tamamlandıktan ve mikrodiziler yıkandıktan sonra, antikor bağlanmasını kromojenik olarak tespit etmek için bunları nitro mavi tetrazolyum ve BCIP renk geliştirme solüsyonu ile kaplayın. Diziyi temiz musluk suyuna batırarak reaksiyonu sonlandırın.
Ardından, dizileri gece boyunca ortam sıcaklığında kurutma kağıdı arasında kurumaya bırakın. Selülozik olmayan bitki hücre duvarı polisakkaritlerini teşhis eden 16 epitopun nispi bolluğu, glikana yönelik monoklonal antikorların basılı ekstraktlara bağlanmasıyla tespit edildi. Ekstrakte edilen glikanların çoğu, alkali sodyum hidroksit fraksiyonu içinde tespit edildi.
Test edilen tüm mango çeşitlerinin kabuklarında ksilan ve arabinoksilanı temsil eden LM-10 ve LM-11 için güçlü bağlanma sinyalleri kaydedildi. LM-10 ve LM-11, sarımsak kök dokusu ekstraktına tercihli bağlanma ve yaprak doku ekstraktına zayıf bağlanma gösterdi. Kısmen metilesterlenmiş veya esterlenmemiş homogalakturonanı temsil eden LM-19, bazı mango çeşidi ekstraktlarına ve sadece kahve hamuru fraksiyonlarına güçlü bir şekilde bağlanmıştır.
