Başlamak için, ameliyat platformu kurulumunu operasyon için 60 santimetreye 60 santimetre tezgah alanına sahip bir odada hazırlayın. Yüzeyi %70 alkolle temizleyin ve tek kullanımlık tıbbi havluyla örtün. Ardından, alanı 30 dakika boyunca ultraviyole radyasyonla dezenfekte edin.
Sekiz haftalık dişi C57 siyah/6 fareyi ameliyattan önce bir hafta boyunca barınma tesisine alıştırmak. Temiz bir pamuklu çubuk kullanarak, anestezi uygulanmış farenin arkasına epilasyon losyonu uygulayın. Üç ila beş dakika sonra, gazlı bez ve pamuklu çubuklarla tüyleri alın.
Daha sonra cildi% 70 etanol ile temizleyin. Fareyi lastik bir şerit veya pamuk ip kullanarak sırtı yukarı bakacak şekilde ameliyat platformuna sabitleyin ve sırtını temizlemek için iyodofor solüsyonu uygulayın. Ovariektomi için, tek kullanımlık bir neşter kullanarak, uyluk tabanından yukarıya doğru uzunlamasına bir santimetrelik bir dorsal kesi yapın, sadece cilt ve deri altı fasyanın kesildiğinden emin olun ve arka peritonu kesmekten kaçının.
Ardından, beyaz bir yağ yastığı görselleştirmek için kesiği sola doğru çekin. Mikroforseps ve makas kullanarak, intraperitoneal boşluğu ortaya çıkarmak için beyaz yağ yastığı boyunca 0,5 santimetre kesin. Arka peritonu kestikten sonra, mikroforseps kullanarak, beyaz yağ yastığını intraperitoneal boşluktan yavaşça ve nazikçe çıkarın.
Çıkardıktan hemen sonra, beyaz yağ dokusunu% 0.9 steril tuzlu suya batırılmış gazlı bezle nemlendirin. Beyaz yağ yastığının alt kısmında, pembe tanecikli maddeleri yumurtalık olarak tanımlayın ve rahme bağlı olduklarından emin olun. 5O emilebilir dikişler kullanarak uterusun yumurtalık ucunu bağlayın.
Ardından, cerrahi aletler ve yumurtalıklar arasında doğrudan temastan kaçınarak yumurtalık dokusunun intraperitoneal implantasyonunu önleyerek sol yumurtalığı çıkarın. Ameliyattan sonra, beyaz yağ yastığını dikkatlice intraperitoneal boşluğa yerleştirin. Daha sonra, 5-0 emilebilir bir sütür kullanarak, posterior peritonda aralıklı bir sütür yapın.
Kanama alanlarını% 0.9 steril tuzlu suya batırılmış gazlı bezle temizleyin. Ardından, cilt kesisini sağa doğru çekin ve aynı yöntemi kullanarak sağ yumurtalığı çıkarın. 4-0 emilmeyen dikişlerle aralıklı dikiş atın ve kanamaları %0,9 steril tuzlu suya batırılmış gazlı bezle temizleyin.
Her iki dikişi de tamamladıktan sonra, yarayı bir iyodofor solüsyonu ile temizleyin. 24 saat sonra, ağrıyı hafifletmek için deri altına meloksikam enjekte edin. Herhangi bir komplikasyon belirtisi olmadan uygun cerrahi yara iyileşmesini doğrulamak için fareyi günlük olarak izleyin.
Üç gün sonra, fareyi taze hazırlanmış estradiol valerat ile besleyin. FSH enjeksiyonu için, rekombinant insan FSH tozunu %0.9 steril salin içinde mililitre başına 100 uluslararası birime çözerek FSH çözeltisini hazırlayın. Rekombinant FSH'nin biyolojik aktivitesine göre, iki hafta boyunca intraperitoneal enjeksiyon yoluyla çözücü veya farklı dozlarda rekombinant FSH uygulayın.
Papanicolaou ile boyanmış hücrelerin yayma görüntüleri, östrus döngüsünün proöstrus, östrus, metestrus ve diestrus aşamalarını açıkça tanımladı. Buna karşılık, bilateral ovariektomi fareleri östrus döngüsünü kaybetti. ELIZA yöntemi, bilateral ovariektomi farelerinde sham grubu farelere kıyasla serum estradiol seviyelerinde önemli bir azalma gösterdi.
Ekstra gonadal dokuda sentezlenen endojen östrojen, FSH ile tedavi edilen fare modelinde östrojen seviyelerinin stabilitesini etkilemez.
