Mikrodiyaliz lifini ön kola yerleştirdikten sonra, tek kullanımlık şırıngayı mikroinfüzyon pompalarındaki şırınga tutucu tepsisine yerleştirin. Hiperemi aşamasında, emzirilmiş ziller, salin veya araç solüsyonu perfüze edin. Prob yapışkan diskini kullanarak yarı geçirgen zarı kapladığından emin olarak yerel ısıtma ünitesini cilde takın.
Lazer doppler akış ölçer probunu yerel ısıtıcının ortasındaki açıklığa yerleştirin ve veri toplama yazılımında Başlat'a tıklayarak kırmızı kan hücresi veya RBC akı değerlerini kaydetmeye başlayın. Aletsiz bir deneğin koluna otomatik bir tansiyon manşonu yerleştirin. Termonötr cilt sıcaklığını korumak için yerel ısıtıcıları 33 santigrat dereceye ayarlayın.
Veri toplama yazılımındaki sürekli kayda yorum eklemek için ekranın sağ üst köşesindeki metin kutusuna tıklayın. Bir yorum yazın, yorumu hangi kanalın alacağını seçin ve Ekle'ye tıklayın. RBC akısı 33 santigrat derece yerel ısıda stabilize olduğunda, yorumu girerek temel veri toplamaya başlayın.
Beş ila 10 dakikalık temel veri toplamadan sonra başlangıç kan basıncını ölçün ve kaydedin. Yorumu girin, veri toplama yazılımına taban çizgisini sonlandırın. Mikroinfüzyon pompalarını kapatın ve laktasyonlu zil çözeltisi şırıngalarını en düşük konsantrasyonda asetilkolin içeren şırınga ile değiştirin.
Yeni şırıngaları sabitledikten ve probdan sıvı perfüzyonunu onayladıktan sonra, mikroinfüzyon pompalarını tekrar açın. Veri toplama yazılımı kaydına yorum olarak başlangıç eksi 10 girin. Perfüzyonun son dakikasında kan basıncını ölçün ve kaydedin.
Belirli bir konsantrasyon için perfüzyon sona erdiğinde, şırıngayı bir sonraki en yüksek konsantrasyonla değiştirin. Son perfüzyondan sonra, yerel ısıtıcı sıcaklığını 43 santigrat dereceye yükseltin. RBC akısının stabilize olmasına izin verin ve zil çözeltisini sodyum nitroprussid ile değiştirin.
Bu maksimal vazodilatasyon aşamasında kan basıncını yaklaşık her üç dakikada bir ölçün ve kaydedin. Maksimum RBC akı platosu oluştuğunda, veri toplama yazılımının sağ alt köşesindeki Durdur'u seçin. Daha önce gösterildiği gibi temel veri toplamayı kaydedin.
Protokolün gereksinimlerine göre, yerel ısıtıcıları 39 veya 42 santigrat dereceye yükseltin. Lokal ısı uygulamasına yanıt olarak RBC akı platolarından sonra, L-Name'i mikrodiyaliz probu aracılığıyla perfüze edin. Ardından, yerel ısıtıcıları 43 santigrat dereceye ayarlayın.
Ardından, 43 santigrat derecede RBC akı platolarından sonra sodyum nitroprussid ile mikrodiyaliz probu bolluğunu başlatın ve akının maksimum platosuna ulaşmasına izin verin. Her doz için bolluk başladığında, RBC akışında bir zirveye kadar sürekli bir artış gözlendi, ardından bir ısı ve SNP'nin neden olduğu bir plato izledi. Sodyum nitroprussidin bolluğu, RBC akışında bir artış olarak gösterilen maksimum lokal vazodilatasyon üretti.
Bir nitrik oksit sentaz inhibitörü varlığında nispeten daha düşük bir RBC akısı gözlendi. Maksimal lokal vazodilatasyon sırasında, önceki nitrik oksit sentaz inhibisyonu nedeniyle RBC akısında üstel bir artış olacaktır. Yerel ısıtma protokolünde, RBC akısında stabil bir plato elde edildikten sonra L-Name perfüze edildi.
RBC akışında, L-Name'e yanıt olarak yeni bir platoya ulaşana kadar hızlı bir düşüş gözlendi. Isıtma, RBC akısında ek bir tepe ve nadir tepki üretti.
