Başlamak için, izole edilmiş CD34 pozitif hücreleri santrifüjleyin ve hücre peletini karışık 4 sitokin ile desteklenmiş 300 mikrolitre önceden ısıtılmış SFM-34 ortamında yeniden süspanse edin ve 10 mikrolitre hücre süspansiyonu kullanarak hücreleri sayın. Hücreleri 150 mikrolitre sitokin takviyeli SFM-34'ün son hacminde saydıktan ve yeniden süspanse ettikten sonra, buna 0.5 mikrolitre ROCK inhibitörü ekleyin. Bir P200 pipetinin ucunu kanalın kenarındaki rezervuarın içine yerleştirerek laminini akışkan talaşlardan yavaşça aspire edin.
Ardından, kabarcık oluşmadığından emin olarak hücre süspansiyonunu tutarlı bir şekilde kanala ekleyin. Hücreleri kanala tamamen bağlamak için çipi gece boyunca 37 santigrat derece ve% 5 karbondioksitte inkübe edin. Endotel hücreleri tamamen bağlandığında, ortamı daha önce tarif edildiği gibi aspire edin.
Çipe 200 mikrolitre sitokin takviyeli SFM-34 ekleyin. Hücreler %90 ila %100 birleşime ulaşana kadar ortamı günlük olarak değiştirin.
