Perfüzyon setini üreticinin protokolüne göre üniteye takın. Bir davlumbazın içine, boş bir akışkan çip takın ve her iki rezervuarı da steril koşullar altında doldurmak için sitokin takviyeli SFM-34 ortamı ekleyin. Akışkan ünitesini inkübatöre aktarın, kabarcık giderme ve kalibrasyon için pompaya bağlayın.
Bağlı setin bulunduğu akışkan üniteyi inkübatörden dikkatlice çıkarın ve hücreleri içeren çiplerle birlikte davlumbaza aktarın. Boruyu test çipinin her iki tarafına sıkıştırın. cl'yi çıkarınamp hortumu test çipinden çıkarın ve hücreleri içeren çipi boruya bağlayın.
Kelepçeleri çıkardıktan veya açtıktan sonra, sistemi inkübatöre aktarın ve hava pompasını akışkan ünitesine bağlayın. Akışkan ünitesini pompadan çıkarın ve davlumbazın içine taşıyın. Boruyu çipin her iki tarafına sıkıştırın ve boruyu çip üzerindeki rezervuarlardan çıkarın.
Ortamı çipten nazikçe çıkardıktan sonra, hücreleri Dulbecco'nun Fosfat Tamponlu Salin veya DPBS ile yıkayın. 150 mikrolitre ayrışma tamponu ekleyin ve 37 santigrat derecede üç dakika inkübe edin. Hücreler ayrıldığında, ayrışma tamponunu bir rezervuardan toplayın ve kanalı bir kez DPBS ile yıkayın.
Çipten kalan hücreleri toplamak için rezervuarı yıkama tamponu ile yıkayın. Son olarak, hücreleri saymak için 10 mikrolitre kullanmadan önce toplanan hücrelere bir mililitre yıkama tamponu ekleyin. Stimülasyondan önce, hücreler rastgele yönelim gösterdiler, ancak stimülasyonla akış yönüne paralel olarak yeniden yönlendirildiler.
Beş gün boyunca akış altında kültürlenen hücrelerin CD34 ekspresyon profili ve akışkan kanaldan alınan CD34 pozitif hücrelerin yüzdesi, protokolün etkinliğini gösterdi.
