BEND3 hücrelerini kültürleyerek başlayın, ardından kuyucukları kontrol grubuna ve kobalt klorür grubuna bölün. Kontrol grubunun üst odasına 200 mikrolitre kültür ortamı ve kobalt klorür grubuna 300 mikromolar kobalt klorür içeren kültür ortamı ekleyin. Plakaları 37 santigrat derecede inkübe edin ve TEER yöntemi ile 12 ve 24 saatlik inkübasyonda direnç değerlerini tespit edin.
Hücre bariyerinin TEER değerlerinin eğilimini haritalamak için ticari yazılım kullanın. Kobalt klorür ile muamele edilmiş hücreler ve kontrol hücreleri arasındaki direnç değerlerindeki farkı analiz etmek için istatistiksel analiz yazılımı kullanın. 300 mikromolar kobalt klorür ilavesi, hem 12 saatlik hem de 24 saatlik zaman noktalarında kontrole kıyasla TEER değerlerinde önemli bir düşüşe neden oldu.
24 saat sonra, 300 mikromolar kobalt klorür grubunun TEER değeri, kontrol grubuna kıyasla azaldı, bu da kobalt klorür nedeniyle hipoksik koşullar tarafından indüklenen hücre bariyerinin parçalandığını gösterdi.