Başlamak için, tarayıcı plakalarının nematodlar yüklü olarak hazır olduğundan emin olun. Genel olarak, plaka başına yaklaşık 40 hayvan ve 200 mikrolitre bakteri çimi, ömür boyu sürecek bir deney için en uygun koşullardır. Tarayıcı plakalarını destekleyecek cam bölmelerin her iki tarafına buğu önleyici bir cam temizleyici uygulayarak deney düzeneğine başlayın.
Ardından, camın tarayıcı plakalarıyla temas edecek tarafına koruyucu bir hidrofobik cam işlemi uygulayın. Beş ila 10 dakika bekleyin ve cam bölmedeki kalıntıları temizleyin. Camın tarayıcı plakalarıyla temas edecek tarafını dezenfekte etmek için% 70 etanol uygulayın.
Bir ila iki dakika bekletin ve ardından etanolü bir bez veya kağıt havluyla çıkarın. Plakaları tarayıcılara yüklemek için, otoklav kauçuk paspaslarını işlem görmüş plaka destek camının üzerine yerleştirin. Yüklü nematodlarla görüntüleme için kullanılan tarayıcı plakalarını alın ve kapağı çıkarın.
Plakaları cam yüzeye bakan kauçuk paspas yerlerine yerleştirin. Plaka yükleme sırasında deneycinin parmaklarını korumak için tarayıcı fanlarının fişini çekin. Plakaları ve onları destekleyen cam levhaları yavaşça tarayıcının yüzeyine kaydırın.
Tarayıcı fanlarını yeniden etkinleştirin ve ön ve yan fanlara güç verildiğini onaylayın. Bu noktada tarayıcıları açın. Deneye başlamadan önce, tüm tarayıcı yüzeyinin önizleme yakalama görüntüsünü elde etmek de dahil olmak üzere temel görüntü alma öncesi adımları gerçekleştirin.
Web arayüzünü kullanarak ana sayfanın görüntü alma bölümünü bulun ve Yakalama Aygıtları ve Görüntü Sunucuları adlı bağlantıyı takip edin. Açılan kutuda, yeni cihazlar ara'ya tıklayın ve sunucuya bağlı her tarayıcının görüntü yakalama cihazları kutusunda göründüğünden emin olun. Yeni yüklenen plakaları içeren her tarayıcıya karşılık gelen onay kutusunu seçin ve ardından önizleme yakalama iste düğmesine tıklayın.
Ardından, Solucan tarayıcısında dosya açma görüntüsünü seçin ve ardından her önizleme yakalama görüntüsünü açmak için istediğiniz görüntüyü seçin. Her görüntü için, plakaları içeren bölgelere karşılık gelen sütunları seçmek için tıklayın. Tüm görüntüler tanımlandıktan sonra, görüntü alımını seçin.
Tarama alanlarını tanımlayın, seçilen tarama alanlarını diske kaydedin ve ardından bölgenin özelliklerini diske aktarmak için istediğiniz konumu seçin. Deney adını, tarayıcılardaki her sütunun fiziksel konumlarını, denemenin toplam süresini ve görüntü yakalama sıklığını içeren bir dosya oluşturun. Bunu bir metin ve XML dosyası olarak kaydedin.
Solucan tarayıcısında görüntü alımına tıklayın, deneme programını gönderin ve oluşturulan XML dosyasını seçin. Solucan tarayıcısı, zamanlamanın bir özetinin çıktısını alıp almayacağını veya denemeyi çalıştırıp çalıştırmayacağını sorar. Bir özet dosyası oluşturun, zamanlanmış yakalamaların tarihlerini, özetteki tarayıcıların konumunu, adını ve sayısını doğrulayın.
Yine, gösterildiği gibi deneme zamanlaması için XML dosyasını yükleyin. Solucan tarayıcısı ikinci kez zamanlamanın özetinin çıktısını mı yoksa denemeyi mi çalıştıracağını sorar. Bu kez, denemeyi çalıştırmayı seçin.
Kullanım ömrü makinesi artık deney programında belirtilen son taramalar tamamlanana kadar bağımsız olarak çalışacaktır. Deneme sona erdikten ve tüm görüntü ve posta ücreti alma adımları gerçekleştirildikten sonra, Solucan tarayıcısını kullanarak otomatik sonuçları el ile doğrulayın. Solucan tarayıcı menüsünde dosyaya tıklayın, geçerli denemeyi seçin ve istediğiniz denemeyi seçin.
Film şeridini oluşturmak için doğrulamaya tıklayın, tüm deneye göz atın ve ardından her solucanın ölümünden hemen sonra seçin. Solucan olmayan nesneleri film şeridinden hariç tutmak için nesnenin görüntüsüne sağ tıklayın. Bir sayfadaki tüm nesneleri aynı anda hariç tutmak için, kontrol tuşunu basılı tutun ve herhangi bir nesneye sağ tıklayın.
Hariç tutulan bir nesneyi analize yeniden dahil etmek için iki kez sağ tıklayın. Film şeridi ek açıklaması sırasında yapılan ek açıklamaları kaydetmek için kaydet düğmesine tıklayın. Film şeridindeki herhangi bir nesneye bir kez sol tıklayarak o nesneyle ilgili ayrıntılı zaman serisi bilgilerini görüntüleyen yeni bir pencere açın.
Ölüm zamanlarını manuel olarak açıklamak için, ölüm zamanına karşılık gelen noktada alt çubuğa sol tıklayın. Zaman dilimleri arasında hareket etmek için boşluk çubuğunu ve klavyenin sağ veya sol oklarını kullanın veya istediğiniz zaman diliminde doğrudan çubuğa tıklayın. İstenilen zaman diliminde alt çubuğa sağ tıklayarak daralma ve genişleme olaylarına manuel olarak açıklama ekleyin.
Sol taraftaki hayatta kalma eğrilerine ve film şeridinin sağ tarafındaki her birey için şiddetli hareketin durma zamanını ölüm zamanıyla karşılaştıran dağılım grafiğine bakın. Bir deney için ölüm zamanları oluşturmak için, Worm tarayıcısında veri dosyalarını, ölüm zamanlarını seçin ve ardından mevcut deney için ölüm zamanları oluştur'a tıklayın. Manuel veri doğrulamanın hayatta kalma eğrileri üzerindeki etkisi burada gösterilmektedir.
Film şeridi açıklamasından önce üretilen ilk hayatta kalma eğrileri, solucan olmayan nesnelerin yanlış bir şekilde dahil edilmesiyle bozuldu. Manuel film şeridi açıklaması sırasında solucan olmayan nesneleri hariç tuttuktan sonra, ortaya çıkan hayatta kalma eğrileri önemli ölçüde iyileştirilmiş çözünürlük gösterdi. Grafiksel gösterim, görüntü elde etme sonrası analizin farklı adımlarında tahmini ortalama kalan ömrü ve bunun solucan ömrü ile korelasyonunu gösterir.
Davranışsal yaşlanma analizinde ölüm sürelerinin manuel olarak açıklanmasının özellikle daha uzun yaşayan solucanlarda önemli olduğu bulunmuştur. Bu durumda, en düşük öküz konsantrasyonlarına maruz kalanlar. Sonuç olarak, yaşam süresi makinesi otomatik ölüm süresi tahmini, hayatta kalma testleri için yeterince doğrudur.
Davranışsal yaşlanma tahlilleri manuel açıklamalardan yararlanabilir.
