Bang-Sensitive Assay for the Study of Seizure-Like Behavior in Drosophila

Başlamak için, tub-Gal4 hibrid hattının bakire sineklerini ve UAS-cac-RNAi hattının erkek sineklerini toplayın. Yavruları hasat etmek için bakire ve erkek sinekleri aynı şişeye aktarın. Üç ila beş günlük tıkanıklıktan sonra, yavruları toplamak için bir fırça kullanın ve tub-GL4 UAS-cac-RNA sinekler.

Testten bir gün önce, sinekleri yiyecekle birlikte yeni temiz şişelere aktarın. Daha sonra, dört ila altı karbondioksit anestezi uygulanmış sineği dikkatlice taze şişelere yerleştirin. Beyaz tahtanın önündeki tripoda bir kamera yerleştirin.

Kameranın odağını boş bir flakon ile manuel olarak ayarlayın. Şimdi, şişeleri sinekler ile 10 saniye boyunca en yüksek ayarda vorteksleyin. Şişeyi hemen beyaz tahtaya yerleştirin ve herhangi bir nöbet benzeri davranış için sinekleri gözlemleyin.

İyileşme süresini, sineklerin dik durma yeteneğini yeniden kazanması için gereken süre olarak ölçün. Cac knockdown sinekleri, vahşi tip sineklerden önemli ölçüde daha yüksek nöbet benzeri davranış oranları gösterdi. Devrilen sineklerin bir saniye içinde iyileşme yüzdesi, vahşi tip sineklerden önemli ölçüde daha düşüktü.