Başlamak için, kan hücrelerini çıkarmak için insan kanını oda sıcaklığında 20 dakika boyunca 120 G'de santrifüjleyin. Ardından süpernatantın üst yarısını yeni bir tüpe aktarın. Daha sonra, trombositleri çıkarmak için trombositten zengin plazmayı santrifüjleyin ve süpernatantın üst yarısını yeni bir tüpe aktarın.
Daha sonra trombositi iki dakika boyunca 13.000 G'de plazmamıza santrifüjleyerek hücre kalıntılarını çıkarın. Süpernatantın üst yarısını yeni bir tüpe aktarın. Hücre dışı vezikülü veya EV ile etkinleştirilen pıhtılaşma süresini tespit etmek için pıhtı analizörünü açın ve cihazı önceden 37 santigrat dereceye ısıtın.
Tek kullanımlık probu ve test kabını takın. Ardından makinenin kalite kontrol prosedürünü başlatın. Kalite kontrol çalışmasından sonra numune bilgilerini sisteme giriniz.
Daha sonra test kabına 200 mikrolitre EV açısından zengin plazma, ardından 20 milimolar, 170 mikrolitre kalsiyum klorür ekleyin. Başlat düğmesine tıklayın, kapağı kapatın ve probun numune direncindeki değişikliği algılamasına izin verin. Niteliksiz EV örnekleri, EV.In kontrast kapısının yakınında biraz daha büyük parçacık boyutuna sahip ayrı bir küme sergiler, nitelikli EV açısından zengin örnekler, EV kapısı içindeki çoğu sinyali tek bir grup olarak gösterdi.
EV konsantrasyonundaki bir artış EV aktif pıhtılaşma süresini kısaltırken, EV konsantrasyonundaki bir azalma EV aktif pıhtılaşma süresini uzattı. Preeklampsi, kalça kırığı ve akciğer kanseri olan hastalardan alınan EV'den zengin plazma örnekleri, sağlıklı gönüllülere kıyasla EV ile aktive edilen pıhtılaşma süresini önemli ölçüde kısalttı.
