Başlamak için 16 santimetre uzunluğunda, 12 santimetre genişliğinde ve 20 mikrometre kalınlığında bir polietilen plastik film alın. Standart 30 oyuklu PCR düzeninde 96 yarı dairesel çıkıntıyı bastırmak için bir cam taşlama aleti kullanın. Preslenmiş polietilen plastik filmin her iki tarafını dezenfekte etmek için bir saat boyunca UV ışığına maruz bırakın.
Yarım daire şeklindeki yüzeye az miktarda% 10 polivinil alkol ekleyin. Daha sonra, yaklaşık 3.000 anestezi uygulanmış dişi trichogramma dendrolimi yaban arısını bir toplama kutusuna yerleştirin. Film yumurta kartının dışbükey tarafını toplama kutusuna doğru yerleştirin ve kenarlarını bir lastik bantla sabitleyin.
Şimdi her çıkıntıya dört mikrolitre amino asit çözeltisi ekleyin. Sonra başka bir polietilen plastik film parçasıyla örtün. Toplama kutusunu iki plastik tabakayla sıkıca kapatmak için bir lastik bant kullanın.
Yaban arılarının dört ila sekiz saat boyunca serbestçe parazitlenmesine izin verin. Parazitleme sırasında ıslak pamuktan% 10 sükroz suyu sağlayın. Daha sonra, yapay yumurta kartının iç çıkıntısından parazitlenmiş amino asit çözeltisini elde edin ve 1.45 mililitrelik tüplerin kapağına aktarın.
Tüp kapağını 25 milimetre çapında 10 mikrometrelik bir naylon ağ ile örtün. Ardından naylon ağı tüpe hafifçe sabitleyin. Sağ üst tüpü 10 saniye boyunca 1.360 g'da santrifüjleyin.
Zehri içeren filtrelenmiş çözeltiyi toplayın. Daha fazla analiz için zehri eksi 80 santigrat derecede saklayın. Zehir örneklerinin BCA analizi, zehir proteini konsantrasyonunun mikrolitre başına 0.35 ila 0.46 mikrogram arasında değiştiğini gösterdi.
Amino asit çözeltisinin negatif kontrolü, mikrolitre başına sadece 0.03 ila 0.05 mikrogramlık bir protein konsantrasyonuna sahipti. Zehrin SDS-PAGE analizi, 10 kilodaltonun altından 130 kilodaltonun üzerine kadar uzanan bir protein aralığı gösterdi.
