Başlamak için, çözülmüş bazal membran matrisini buzdan çıkarın. Bazal membran matrisinin hesaplanan hacmini gastrik biyopsi türetilen tek hücrelere ekleyin ve yaklaşık 10 saniye boyunca yukarı ve aşağı pipetleyerek hafifçe karıştırın. Daha sonra bir pipet kullanarak, matrisin 50 mikrolitrelik alikotlarını ve hücre karışımını 24 oyuklu bir doku kültürü plakasındaki tek tek kuyucukların merkezine hızla aktarın.
Plakayı hemen kapatın ve tek bir yumuşak hareketle plakayı ters çevirin. Bazal membran matrisinin polimerize olmasını sağlamak için ters çevrilmiş plakayı 35 dakika boyunca 37 santigrat derece doku kültürü inkübatörüne yerleştirin. Ardından, her bir kubbenin tepesinin ortama tamamen daldırıldığından emin olurken, her bir oyuğa 500 mikrolitre önceden ısıtılmış mide organoid ortamı ekleyin.
Organoidler genellikle tek hücrelerin tohumlanmasından sonraki 10 gün içinde tanımlanabilir. 20. günde, büyüktürler ve tipik olarak geçişleri gerekir. Vücut ve antral organoidlerin sayısı, önemli ölçüde olmasa da, azalmadan önce tohumlamadan sonraki 10. günde zirve yapar.
Manto biyopsi dokusundan üretilen organoidler, vücut biyopsi dokusundan üretilen organoidlere kıyasla daha yüksek bir büyüme oranı sergiledi. Farklı hastalar arasında, herhangi bir tek kubbede tipik olarak çeşitli organoid morfolojisi gözlendi. Bununla birlikte, ortalama olarak, organoid spastisite çok az varyasyon gösterdi.
