Kütle spektrometresine veya LC-TIMS-TOF-MS/MS için MS kalibrasyonuna başlamak için TIMS kontrol yazılımını açın ve kalibrasyon alt sekmesi altında m/z'ye tıklayın, Dropbox'tan ayar karışımını seçin ve sağ alt köşedeki kalibre et'e tıklayın. %100 puan elde edilene kadar tıklama kalibrasyonuna devam edin. Şimdi mobilite sekmesini seçin ve %100 kalibrasyon puanına ulaşılana kadar gösterildiği gibi aynı adımları izleyin.
Kalibrasyon eğrisindeki her bir kalibrasyon noktasını oluşturmak için, lipid iç standart karışımını 10 mikrolitre döteryumlu iç standart karışımla eşleştirin. İstenilen aralıktaki yedi kalibrasyon noktası için bu tür yedi çivili numune hazırlayın. Veri analizi yazılımını kullanarak, pasif MS/MS modellerine dayalı olarak yağ asidi zincirlerine manuel olarak açıklama ekleyin.
Kararlı izotop etiketlemesini veya SIL verimliliğini belirlemek için, SIL içeren izotopların alanının, SIL içermeyen izotopların alanına oranını hesaplayın. Herhangi bir yerde etiketli bir atom bulma olasılığını belirleyerek teorik modeli hesaplayın. Deneysel izotop profillerini veri analizi yazılımında simüle edilen teorik modelle uyumlu hale getirerek SIL zenginleştirmesini hesaplayın.
Çalıştırmayı başlatmak için termometre düğmesine tıklayarak kolonlu fırını etkinleştirin ve vana düğmesine tıklayarak pompaları etkinleştirin. MS yöntemini daha önce kaydedilen uygun yönteme ayarlayın. Enjeksiyon hacminin beş mikrolitre olduğunu doğrulayın ve bir hedefin şişesini 20'ye bir hizalayın ve numune listesini kaydedin.
Diziyi başlatın ve sistemde görüntülenen enjekte edildi mesajıyla enjeksiyonun başarılı olduğunu onaylayın. Birinci satırı kopyalayın ve yeni bir ikinci satır oluşturmak için aşağıya yapıştırın. Deneye bağlı olarak ikinci satırı örneklerle doldurun.
Otomatik numune alma cihazında doğru konumun kullanıldığından emin olun. Mobil fazlar tazeyse, önceki sonuçlarla karşılaştırmak için önce üreticinin lipit karışım standartlarıyla bir tepe şekli testi yapın. Lipid karışımı ve standartlar ekranda görüntülenir.
Yeni satırların doğru ayırma yöntemine sahip olduğundan ve birinci satırda kullanılan ön koşullandırma yöntemine sahip olmadığından emin olun. Girilen MS yönteminin doğru olduğundan emin olun. Doğru işleme yönteminin yüklenip yüklenmediğini ve otomatik çalıştırma işleminin etkinleştirilip etkinleştirilmediğini kontrol edin.
Mevcut çalışma bittikten sonra numunelerin analiz edildiğinden emin olmak için numune listesini kaydedin.
