Başlamak için, seçilen maya dönüştürücüsünü doygunluğa ulaşılana kadar 30 santigrat derecede üç mililitre SD URA ortamında büyütün. Kültürün optik yoğunluğunu 600 nanometrede ölçün. Gece kültürünün iki mililitresini oda sıcaklığında 14.000 G'de santrifüjleyin.
Süpernatanı pipetleyin. Peletin bir mililitre MES tamponunda yeniden süspanse edilmesi. Karışımı oda sıcaklığında 14.000 G'de santrifüjleyin.
Ardından, süpernatanı çıkarın. Hücreleri bir kez daha MES tamponu ile yıkadıktan sonra, hücreleri iki mililitre MES tamponunda tekrar süspanse edin. Ardından, tüm hacmi bir reaktif haznesine dökün.
Ardından, mikroplaka okuyucuyu kurun. Protokolü yönet simgesine gidin, ardından ölçüm türünü floresan yoğunluğuna ve okuma modunu spektral taramaya ayarlayın. Mikroplaka adını GREINER 96 F BOTTOM'a girin ve alt optiği ayarlayın.
Emisyon üzerinden taramayı ayarla'yı seçerek optik ayarlara erişin. Uyarma dalga boyunu 10 nanometre uyarma bant genişliği ile 433 nanometreye ayarlayın. Emisyon dalga boyu aralığını 460 nanometre ile 550 nanometre arasında 10 nanometre emisyon bant genişliği ve bir nanometre adım genişliği ile ayarlayın.
Ayar süresini 0,1 saniyeye ayarlayın. Şimdi, 96 iyi berrak tabanlı siyah bir plakanın kuyucuklarında değişen konsantrasyonlarda sodyum klorür çözeltisi hazırlayın. A sırasının ilk üç kuyucuğuna 150 mikrolitre MES tamponu yükleyin.Ardından, karşılık gelen ozmolit çözeltisinden 150 mikrolitreyi soldan sağa doğru artan sırayla pipetleyin.
12 kanallı bir mikropipet ile yıkanmış maya süspansiyonunu birkaç kez pipetleyin. Ardından, her bir kuyucuğa 50 mikrolitre hücre süspansiyonu aktarın. Eşit şekilde karışmasını sağlamak için her bir kuyucuğun içeriğini birkaç kez pipetleyin.
Floresan yoğunluğu emisyon spektrumlarını hemen ölçün. Ekranda görüntülenen floresan emisyon spektrumlarını gözlemleyin. IDR yapıları, mCerulean3 ve sitrin emisyon spektrumlarının bir kombinasyonunu sergiledi.
AtLEA45 için hiperozmotik stres, vericinin floresan yoğunluğunun azalmasıyla alıcının floresan yoğunluğunda bir artışa neden oldu. Bu, albümin yapısında gözlenmedi.
