Canlı Caenorhabditis elegans Solucanında Aksonal Taşımayı Görselleştirme

Başlamak için, görüntüleme için hazırlanan caenorhabditis elegans slaytını alın. Nematodları bulmak için 4x ila 20x büyütme merceğinin altındaki slaytı gözlemleyin. Konumlarını hatırlayın ve ardından ayrıntılı görüntüleme için 63x büyütme lensine geçin.

Alım parametrelerini değerlendirmek için ilk görüntüyü yakalayın. Yoğunluk histogramını kullanarak sinyal yoğunluklarını izleyin ve gerekirse uyarma lazer yoğunluğunu artırın. Daha sonra, 488 nanometrelik bir lazer kullanarak, analiz edilecek akson bölgesini ağartın.

Ağartma verimliliğini belirlemek için ağartma adımından önceki ve sonraki sinyal yoğunluğunu karşılaştırın. Bireysel taşıma olaylarının sinyal yoğunluğunu artırmak için ikiye iki gruplama kullanın. Pozlama süresini artırın ve Rab3 taşıma olaylarını takip etmek için ardışık zaman noktaları arasında 300 ila 700 milisaniye arasında bir zamansal çözünürlük kullanın.

Sinyal yoğunluğuna ve taşıma olaylarının sıklığına bağlı olarak bir ila üç dakikalık bir zaman atlaması kaydedin.