1 Başlamak için, hastalardan tümör dokusunu 2 alınve bir kıyıcı ile işleyin. 3 Doğranmış tümör 4 içeren Petri kabını 45 dereceye kadar eğin ve H-GPSA ortamının 2,5 mililitresini 5 dikkatlice çıkarın. 6 Tümör parçalarını yıkamak için, iki mililitre 7 RBC lizis tamponu ekleyin ve bir orbital çalkalayıcı 8 içinde yavaş bir hızda inkübe edin.
9 Ardından, lizis tamponunu tamamen atın. 10 Daha sonra, doku parçalarına 12 dört mililitre hastadan türetilmiş 11 organoid ortam ekleyin ve doku parçalarını ultra düşük bir ataşman 13 altı kuyulu plakaya aktarın. 14 Plakayı iki ila dört hafta boyunca bir orbital çalkalayıcıda 15 inkübe edin.
16 Her iki günde bir, harcanan ortamın 17 yarısını önceden ısıtılmış, hastadan elde edilen organoid bir ortamla değiştirin. 18 Doku hipoksisini önlemek için, 19 hastadan elde edilen organoidleri 20 steril bir cam Petri kabına 21 aktarın ve doku morfolojisini mikroskop altında gözlemleyin. 22 Sonra bir neşter kullanarak yapışkan dokuyu kesin.
23 Doğrayıcı yöntemi kullanılarak elde edilen hasta kaynaklı organoidler, 24 elle doğrananlara kıyasla bir hafta içinde 25 istenen yuvarlak şekle ulaştı. 26 Ve bu yöntem kullanılarak oluşturulan organoidlerin sayısı 27 önemli ölçüde daha yüksekti.
