1PBS'de 3 farenin scBAT'ını içeren cam sintilasyon şişesini 2 tezgahın üzerine yerleştirerek başlayın. 4 PBS'yi 10 mililitre soğuk, 5 %4 paraformaldehit ile değiştirin. 6 Şişeyi bir nutatör üzerine yerleştirin, 7 scBAT'ı sabitlemek için gece boyunca dört santigrat derecede sallanın.
9 Ertesi gün, paraformaldehit çözeltisini 10 10 ila 15 mililitre PBS ile değiştirin. 11 Şişeyi bir nutatörün 12 üzerine yerleştirin ve oda sıcaklığında 30 dakika boyunca sallayın. 13 PBS'yi %0,85 tuzlu su 14 ile değiştirin ve 30 dakika daha sallamaya devam edin.
15 Ardından salini 10 mililitre 16% 70 etanol,% 0.85 tuzlu su çözeltisi ile değiştirin. 17 Şişeyi dört derecelik bir buzdolabında, gece boyunca 18 veya parafin gömme için hazır olana kadar saklayın. 19 Ertesi gün,% 70 etanol salin karışımını 20 flakondan çıkarın ve% 95 dehidran alkolden 10 ila 15 mililitre 21 ekleyin.
22 Şişeyi oda sıcaklığında 23 bir saat boyunca bir nutatör üzerinde sallayın. 24 İkinci yıkamadan sonra, 10 ila 15 mililitre 25 %100 kurutucu alkol 26 ekleyin ve bir saat boyunca bir nutatör üzerinde sallamaya devam edin. 27 Gömme için scBAT'ı temizlemek için, şişeye 10 mililitre toluen 28 ekleyin ve scBAT şeffaf olana kadar bir nutatör 29 üzerinde sallanmaya devam edin.
30 Ardından scBAT'ı parafin mumuna gömün. 31 scBAT'ı bir mikrotom 32 ile bölümlere ayırın ve hematoksilen ve eozin boyamaya devam edin. 33 Hematoksilen ve eozin boyaması 34, scBAT'ın hem doğum sonrası hem de yetişkin farelerde çok sayıda küçük multiloküler adiposit 37 dahil olmak üzere 35 kahverengi yağ dokusunun 36 karakteristik doku yapılarını içerdiğini doğruladı.
