Başlamak için, diyot lazer sistemini yeşil dalga boyu için ayarlayın. Lazerleri açın ve önerilen süre boyunca ısınmalarına izin verin. Lazerler sabit bir duruma ulaştıktan ve stabilize olduktan sonra, lazerlerin güç çıkışını ölçmek için bir lazer güç ölçer kullanın.
Her dalga boyu için güç değerlerini kaydedin. Tüm ortamı değiştirdikten sonra, hidrojel içine gömülü yağ türevli kök hücreleri içeren kuyu plakasını diyot lazer sisteminin altına yerleştirin, hidrojelleri, seçilen dalga boyunda seçilen akıcılık için hesaplanan lazer ışınlama süresi ile ışınlayın. Her deney grubunun ışınlanmamış bir kontrole sahip olduğundan emin olun.
Kültür plakalarını %5 karbondioksit takviyesi ve %85 nem altında 37 santigrat derecede inkübe edin. Daha sonra, çalışan bir çözelti hazırlamak için enzimatik hücre geri kazanım çözeltisini PBS ile bir ila 20 oranında seyreltin. Her jele 30 mikrolitre çalışma solüsyonu ekleyin veya geri kazanılması gereken hücreleri içeren kuyu ekleyin.
Geri kazanım solüsyonunun eşit dağılımını sağlamak için plakayı hafifçe sallayın veya döndürün. Plakayı geri kazanım solüsyonu ile 45 dakika inkübe edin. İnkübasyondan sonra, plakayı inkübatörden dikkatlice çıkarın, hücreleri peletlemek için plakaları 1.409G'de 20 santigrat derecede beş dakika santrifüjleyin.
Daha sonra, hücre peletini bozmadan süpernatanı dikkatlice atın. Peletin içine 220 mikrolitre steril PBS pipetleyin. Homojen bir tek hücreli süspansiyon elde etmek için iyice karıştırdığınızdan emin olun.
Adipoz kaynaklı kök hücreler, tohumlama ve fotobiyomodülasyona maruz kaldıktan 24 saat sonra yuvarlak bir morfolojiyi korudu. Hücreler jel boyunca tek hücreler halinde veya üzüm benzeri kümeler halinde dağılmıştır. Morfoloji, 3D kültürde 10 gün sonra değişmeden kaldı.
