Candida glabrata'yı kültürlemeye başlamak için, tüm deneysel materyalleri çalışma platformuna yerleştirin. Bir maya pepton dekstroz veya YPD Agar plakasından tek bir C.glabrata kolonisi seçin. Ve 3 mililitre YPD ortamı içeren bir cam test tüpüne aktarın.
155 RPM'de çalkalayarak 25 santigrat derecede 14 ila 16 saat inkübe edin. İnkübasyondan sonra, 600 nanometre 0.1'lik bir optik yoğunluk elde etmek için kültürü taze YPD içinde seyreltin. Seyreltilmiş kültürü 25 santigrat derecede altı saat boyunca 155 RPM'de çalkalayarak inkübe edin.
YPD'de 600 nanometrede 0.1'de 3 mililitreye kadar bir optik yoğunluğa bir maya süspansiyonu hazırlayın. 30 mikrolitre Etidyum bromür stoğu ekleyin ve maya süspansiyonunu gece boyunca 25 santigrat derecede, 155 RPM'de 45 derecelik bir açıyla inkübe edin. Ertesi gün, kültürün optik yoğunluğunu taze YPD ortamı ile 0.65'e ayarlayın.
96 oyuklu bir plakada, on kat seyreltme için oyuk başına 180 mikrolitre PBS'ye 20 mikrolitre maya süspansiyonu ekleyin. YPD Agar plakasının dört çeyreğine her seyreltmeden 20 mikrolitre plaka koyun. Plakayı gece boyunca 37 santigrat derecede inkübe edin.
Ertesi gün, beş ila 80 kolonili kadranları seçin ve 20 mikrolitre% 20 trifenil tetrazolyum ekleyin. Ve 20 mikrolitre% 20 trifenil tetrazolyum klorürü doğrudan her koloninin merkezine ekleyin. Plakayı 37 santigrat derecede 30 ila 40 dakika inkübe edin.
48 bit tam renkli optik tarayıcı kullanarak plakaları 1200 DPI'da tarayın. DNA birleştirici ajan olan Etidyum bromür, C.glabrata'nın minyon mutantlarını etkili bir şekilde indükler.