Başlamak için tüm steril, 1,5 mililitrelik mikrofüj tüplerini ve steril elektroporasyon küvetlerini buzun üzerine yerleştirin. Daha sonra dört santigrat derecede saklanan steril su şişesini buzun üzerine koyun. Gece boyunca bakteri kültürünün 1.5 mililitresini 1.5 mililitrelik mikrofüj tüplerinden birine aktarın ve hücreleri peletlemek için iki dakika boyunca 13.000 G'de santrifüjleyin.
Bir mililitrelik bir pipet kullanarak, hücre peletini bozmadan tüm süpernatanı çıkarın. Aynı mikrofüj tüpüne 1.5 mililitre bakteri kültürü daha ekleyin, iki dakika boyunca 13.000 G'de santrifüjleyin ve süpernatanı çıkarın. Hücre peletine bir mililitre buz gibi, steril su ekleyin ve pelet artık mikrofüj tüpünün dibinde kalmayana kadar hafif pipetleme ile yeniden süspanse edin.
Yeniden süspanse edilmiş hücreleri iki dakika boyunca 13.000 G'de santrifüjleyin ve bir mililitrelik bir pipet kullanarak süpernatanı dikkatlice çıkarın. Son hücre peletini 200 mikrolitre buz gibi, steril suda nazikçe yeniden süspanse edin ve 100 mikrolitre son hücre süspansiyonunu ikinci buz gibi soğuk 1.5 mililitrelik mikrofüj tüpüne aktarın.