Başlamak için, ameliyattan önce tümörü ve prostat bezindeki konumunu bulmak için çoklu veya biparametrik MRI kullanın. Ardından, hastayı abdominal erişim, insüflasyon ve kemoterapi portu yerleştirme ile hazırlayın. Pnömoperitoneumu 12 milimetreye ayarlayın.
Mesaneyi serbest bırakmak ve perirektal boşluğu incelemek için periton üzerinde bir kesi yapın. Şimdi, her iki taraftaki pelvik fasyayı açın ve prostat ve mesanenin ön ve yan yönlerinin tam bir diseksiyonunu gerçekleştirin. Mesane boynunu açın ve proksimal üretrayı tanımlayın.
Prostat ve mesanenin arka yönlerine erişim sağlamak için proksimal üretrayı bölümlere ayırın. Daha sonra, seminal vezikülleri ve rektum boşluğunu, ardından prostatın lateral yönlerini inceleyin. Tepeyi inceleyin.
Sonra distal üretrayı bölümlere ayırın. Ardından vezikoüretral anastomozu tamamlayın. Prostatı çıkarın, ardından kesiyi dikin.
Taze toplanmış prostatı kuru bir kaba koyun. Prostatı örnek toplama amacıyla işlemek için önce MRI bilgilerine göre hedeflenen bölgeleri seçin. Tek kullanımlık bir otomatik iğne ile seçilen alanlardan silindirik numuneler alın.
Daha sonra silindirin dış bölgesini tanımlayın ve bir çift doku forseps ile sıkıştırın. Silindiri bir slaytın üzerine yerleştirin ve dış bölgeyi doku mürekkebi ile işaretleyin. Toplanan silindirleri, kriyostat gömme ortamı ile doldurulmuş bir numune tutucu diske yatay olarak yerleştirin ve kesmek için bir mikrotom soğutma plakasına aktarın.
Ardından, numune tutucu diski numune tutucu diskini numune aynasına takın. Kesitlemeden önce doku örneğini gömmek için OCT bileşiğini kullanın. Numuneyi 25 santigrat derecede kesmek için bir kriyostat mikrotomu kullanın.
İnce silindir şeklindeki doku kesitlerini işlenmiş mikroskop slaytları üzerine toplayın. Slaytları %96 etanol içinde sabitleyin, ardından damıtılmış suyla nemlendirin. Harris hematoksilen içindeki bölümleri bir dakika boyunca boyayın.
Şimdi hematoksilini maviye çevirmek için slaytları% 30 amonyum hidroksit ile tedavi edin. Daha sonra yıkanmış slaytları 30 saniye boyunca eozin ile boyayın. Daha sonra slaytları artan alkol titrasyonları ile kurutun ve ardından %100 ksilen ile temizleyin.
Slaytları GPX ile monte edin ve lekeli dokunun üzerine bir kapak fişi yerleştirin. Lekeli numuneyi analiz etmek, karsinom ile alanları ayırt etmek ve tümörün Gleason skorunu belirlemek için bir ışık mikroskobu kullanın. Slaytlarda kesin tümör bölgelerini işaretleyin.
Daha sonra cerrahi bıçakla, OCT diski içindeki slayt üzerinde işaretlenmiş numune alanlarını makro-mikrodiseksiyon yapın. Gömme doku çözülmeye başladığında, dokuyu bir çift forseps ile kaldırın ve doğru şekilde etiketlenmiş kriyotüplere yerleştirin. Bu teknik, incelenen olguların %61'inden tümör materyali elde etmek için kullanıldı.
16 prostattan tümör edinimi başarısız oldu, 10'unda %10'dan az tümör yükü vardı ve hiçbiri %20'yi aşmadıBir ROC eğrisi analizi, 0.843 eğrisinin altında bir alan gösterdi, bu da bu yöntemin tatmin edici tümör edinimi sonuçları verebileceğini gösteriyor. Radikal prostatektomi spesimeni ile işlenmiş silindir biyopsisinin histopatolojik korelasyonu hematoksilen ve eozin boyaması kullanılarak yapıldı. Silindir boyunca, kanserli hücreler tarafından kaplanmış küçük, iyi şekillendirilmiş bezleri gösteren Gleason model 3 gibi farklı histolojik modeller bulundu.
Gleason paterni 4 kesitinde genişlemiş atipik hücrelere sahip düzensiz şekilli bezler gözlendi. Prostat intraepitelyal neoplazisi olan örneklerde duktal boşluklarda kalabalık hücreler görüldü.
