Drosophila OR42A Reseptörünün Etil Butirat (EB) Deneyime Bağlı Sinaptik Budamasını Analiz Etmek İçin Beyin Diseksiyonu

Başlamak için, 24 saat boyunca mineral yağ ve EB'ye maruz kalan drosophila sineklerini alın. Şişeleri bir araç kontrolü veya EB'ye maruz kalmış olarak etiketleyin ve bu tanımlamaları beyin diseksiyonu ve işleme boyunca koruyun. Forseps kullanarak, anestezi uygulanmış tek bir sineği taze yapılmış PBS'nin küçük bir tabağına aktarın.

Tam beyin diseksiyonu için sineği PBS'ye tamamen daldırın. Ardından, bir sinek ventral tarafı yukarı gelecek şekilde konumlandırın. Bir forseps ile üst göğüs kafesini, diğeriyle de hortumun altından başını kavramak için iki ince keskinleştirilmiş forseps alın.

Kafayı çıkarmak için başı ve vücudun geri kalanını zıt yönlerde çekin. Başın torakstan kolayca ayrıldığından ve diseksiyon için izole edilmiş kafayı terk ettiğinden emin olun. Daha önce göğüs kafesini kavramak için kullanılan forsepsleri hortumun karşı tarafının altına kaydırın.

Gözlerin arasını yırtmak ve beyni ortaya çıkarmak için dış iskelet kütikülünü zıt yönlerde nazikçe çekin. Tüm parçaların çıkarıldığından emin olarak dış iskelet kütikülünü baştan çıkarmaya devam edin. Şimdi, bir P20 pipet ucunu PBS ve% 0.2 Triton X-100 ile durulayın.

Beyinleri, diseksiyondan hemen sonra kapak tüpündeki sabitleme solüsyonuna aktarın.