Başlamak için elektronik bir Vernier kumpas alın, dış çenesini kulağın dış kenarının orta noktasına yerleştirin ve kulak kanalına uzatın. Kalınlığı çizgi boyunca üçte iki ve yarım noktada ölçün ve kaydedin. Ardından, farenin kafasını bir tarafa eğin ve kulağı yukarı doğru yönlendirin.
50 gün boyunca günde bir kez kulağın hem ventral hem de dorsal taraflarına 25 mikrolitre oleik asit uygulayın. 34 veya 36 gauge iğne ile donatılmış bir mililitrelik bir şırınga kullanarak, kulağın ventral yüzeyine intradermal olarak 50 mikrolitre cutibacterium acnes süspansiyonu enjekte edin. 25. günde, kulakların kalınlığını ölçün ve kaydedin.
Ötenazi uygulanmış farenin kulaklarını kestikten sonra, sekiz milimetrelik bir halka matkap kullanarak kulaklara sabit boyutta delikler açın. Kulak bölümlerini hazırlayıp boyadıktan sonra ışık mikroskobu altında gözlemleyin. Bir patolog tarafından takip değerlendirmesi için patolojik değişiklikleri kaydedin ve bu değişikliklere burada gösterilen tabloya göre puanlar atayın.
Oleik asit ve cutibacterium acnes gruplu oleik asitteki kulaklarda kalınlaşma, sertleşme, eritem, pullanma ve komedonlar ve kaşıma nedeniyle ara sıra kanama görüldü. Histopatolojik incelemede oleik asit ve oleik asit ile cutibacterium acnes gruplarında parakeratoz, hiperkeratoz ve hipertrofi saptandı. Patolojik skorlama, bu gruplarda kontrol grubuna göre şiddetin arttığını gösterdi.
İmmünohistokimya, cutibacterium acnes dermisinde TNF alfa ekspresyonunun ve cutibacterium acnes gruplarıyla oleik asit ekspresyonunun daha yüksek olduğunu gösterdi.
