Başlamak için, fare ameliyatı için gerekli tüm malzemeleri ameliyat masasına yerleştirin. Anestezi uygulanmış fareyi masanın üzerine yerleştirin ve yastığın boynunun altında olduğundan emin olun. Dezenfektan başına üç kez dairesel betadin veya klorheksidin ve alkol çubukları değiştirerek cerrahi bölgeyi dezenfekte edin.
Anestezinin derinliğini doğrulamak için bir ayak parmağınızı sıkıştırın. Cerrahi bant kullanarak, farenin ön bacaklarını kısıtlayın. Diseksiyon mikroskobu altında, farenin boynunun ventral yüzeyini görünür hale getirin ve cerrahi bölgeyi rahatça gözlemlemek için büyütmeyi ayarlayın.
Bir santimetre boyuna orta hat kesisi yaptıktan sonra, kapalı makasın ucunu kesiye sokun ve iki tükürük bezini ayırarak deri altı bağ dokusunun künt bir diseksiyonunu gerçekleştirmek için hafifçe açın. İnce forsepslerin yardımıyla, dış yüzeyde durmak için sağ tükürük bezini kesiden nazikçe çekin veya tükürük bezini yanal olarak geri çekmek için künt bir kanca ekartörü kullanın. Sternokleidomastoid ve digastrik kaslar görünene kadar bağ dokusunun künt diseksiyonuna devam edin.
Açılı uçlu forseps kullanarak, juguler ven, vagus siniri ve ortak karotis arteri veya CCA'yı ortaya çıkarmak için kas üçgeninin kaudal ucuna yakın bağ dokusunun dikkatli diseksiyonuna devam edin. CCA etrafındaki bağ dokusunu kas üçgeninin tabanından omohyoid kasa kadar diseksiyona devam edin. Küçük kanamaları kontrol etmek ve tükürük bezlerinden salgılanan sıvıları emmek için küçük pamuk topları kullanın.
CCA'yı vagus sinirinden ayırmak için bağ dokusunu inceleyin, vagus sinirinin işlenmesini ve zarar görmesini en aza indirmek için özel dikkat gösterin. CCA'yı mobilize ettikten sonra, sternuma bir santimetrelik 6-0 sütür parçası yerleştirin ve açılı uçlu forsepsleri CCA'nın altından geçirin. Açılı uçlu forseps sağ elinizde ve ince forseps sol elinizde iken, dikişi açılı uçlu forsepslere geçirin ve dikişin ucuna yakın bir yerden kavrayın.
Sütürün uzunluğunun yarısını CCA'nın altına yavaşça çekin. İkinci bir dikiş yerleştirdikten sonra, düğümleri sıkmadan veya kan akışını kısıtlamadan her bir sütürü CCA'nın etrafına gevşek bir şekilde bağlayın. Açılı uçlu forsepsleri kullanarak, CCA'yı ve dış karotis arter ve iç karotis artere bifurkasyonunu bulmak için omohyoid kasın üzerindeki kas üçgeninin üst ucundaki bağ dokusunu dikkatlice çıkarın.
Daha sonra sternuma bir parça sütür yerleştirin ve bifurkasyonun yakınındaki dış karotis arterin her tarafından bağ dokusunu dikkatlice temizleyin. Açılı uçlu forsepsleri dış karotis arterin altından geçirin. Sol elinizdeki ince forsepslerle, dikişi iç ve dış karotis arter arasındaki boşluktaki açılı uçlu forsepslere geçirin ve dikiş uzunluğunun yarısını nazikçe çekin.
Düğümü sıkmadan dikişi dış karotis arterin etrafına gevşek bir şekilde bağlayın. Bükülmüş iğneyi hazırlamak için, eğim yukarı bakacak şekilde 33 gauge yarım inçlik bir iğne tutun. İğnenin ucunu steril bir iğne ucu ile kavrayın ve eğime doğru yaklaşık 30 ila 40 derece bükün.
Dış karotis arterin etrafındaki dikişin düğümünü sıkın. Daha sonra CCA üzerindeki alt sütürü mümkün olduğunca sternokleidomastoid kasa doğru kaydırın ve düğümü sıkın. Enjeksiyon sırasında salgılanan sıvıyı ve kanı emmek için boşluğun kenarına bir pamuk top yerleştirin.
Şırıngayı sağ elinizde ve ince forsepsleri sol elinizde tutarak, iğneyi CCA'daki alt sütürün hemen üzerindeki artere getirin. İnce forsepslerle, CCA'ya düşük bir gerilim seviyesi yerleştirmek için alt sütürün gevşek ucunu kaudal yönde nazikçe çekin. İğneyi eğimin hemen yanından CCA'ya sokun ve dikişteki gerilimi yavaşça serbest bırakın.
Sol elinizle, ilgilenilen veya kontrol edilen ajanı içeren çözeltiyi yavaşça enjekte etmek için şırınga pistonunu itin. Daha sonra CCA üzerindeki gevşek bağlanmış üst sütürü ince forseps ile kavrayın ve arteri bükmek için kaldırın. İğneyi çıkarın ve şırıngayı bir kenara koyun.
Sağ eldeki açılı uçlu forseps ile arterdeki bükülmeyi koruyun ve CCA'daki üst dikişteki düğümü sıkın. Pamuk topları kullanarak, cerrahi boşlukta kalan kanı emdirin. CCA'daki enjeksiyon bölgesini bulun ve kapatmak için gereken sütür sayısını belirleyin.
Pıhtılaşmış kanı çıkarmak için CCA'nın izole edilmiş alanının enjeksiyon bölgesini ve lümenini steril tuzlu su ile iyice sulayın. Açılı uçlu forsepsleri kullanarak 9-0 dikiş iğnesini kanalizasyona yakın bir şekilde kavrayın. Arteri tutun ve CCA kenarlarını ince forsepslerle birlikte hafifçe bastırın.
Daha sonra iğneyi ve dikişi tek bir ısırıkla arterin her iki tarafından geçirin. Kesi bölgesini bir cerrah düğümü ile kapatmak için, en az dört atış kullanarak ince forseps ve açılı uçlu forseps ile bir alet bağı yapın. İnce forsepsleri kullanarak, dış karotis arterin etrafındaki dikişi çözün ve çıkarın, ardından dolaşımı yeniden sağlamak için CCA üzerinde bir üst dikiş atın.
CCA'daki alt dikişi yavaşça gevşetin, ancak hemen çözmeyin. Enjeksiyon bölgesinin yeterince kapalı olduğunu onayladıktan sonra, üst ve alt CCA dikişlerini çıkarın. Tükürük bezini boşluğa yeniden yerleştirin ve steril bir dikiş paketi kullanarak, her üç ila dört milimetrede bir yerleştirilen bir dikişle insizyonu kapatın.
GFP işaretli kemik iliği insan mezenkimal kök hücrelerinin intrakarotis enjeksiyonundan sonra, beyin kesitlerinin immünohistokimyası, kemik iliği insan mezenkimal kök hücrelerinin gliomlara yönlendirildiğini gösteren GFP pozitif hücrelerin varlığını ortaya çıkardı. CCA ligasyonu ve CCA onarım prosedürleri arasında GFP insan mezenkimal kök hücre hedef arama etkinliğinde anlamlı bir fark gözlenmedi. GFP insan mezenkimal kök hücrelerinin tümör içindeki dağılımı, CCA ligasyonu ve CCA onarım grupları arasındaki yüksek güçlü alanlardaki GFP pozitif hücrelerin medyan sayıları arasında anlamlı bir fark göstermedi.
