Başlamak için, sıvı nitrojenden hücreler içeren kriyo şişesini alın ve iki dakika boyunca 37 santigrat derece su banyosunda çözdürün. Çözülmüş hücreleri 15 mililitrelik bir tüpe aktardıktan sonra, yavaş yavaş 10 mililitre önceden ısıtılmış ortam ekleyin ve tüpü santrifüjleyin. Süpernatanı atın ve hücreleri FBS ve kalsiyum klorür içeren bir mililitre takviye DPBS'de yeniden süspanse edin.
Daha sonra, bir mililitre hücre süspansiyonunu, her biri 50 mikrolitre ölü hücre temizleme kokteyli ve biyotin seçim kokteyli ile beş mililitrelik polistiren yuvarlak tabanlı bir tüpte karıştırın ve inkübe edin. Girdaplamadan sonra, hücre süspansiyonuna 100 mikrolitre dekstran boncuk ekleyin ve pipetle iki kez hafifçe karıştırın. Daha sonra karışıma 1.3 mililitre takviye edilmiş DPBS ekleyin ve oda sıcaklığında üç dakika boyunca bir mıknatıs ile inkübe edin.
Canlı hücre süspansiyonunu yeni bir 15 mililitrelik konik tüpe dökmek için mıknatısı ve tüpü ters çevirin. Hücreleri bir santrifüjde emedin. Süpernatantın çoğunu çıkardıktan sonra,% 0.04 sığır serum albümini içeren bir mililitre DPBS'deki hücreleri yeniden süspanse edin.
