Transmisyon elektron mikroskobu için sabit retinal organoidleri veya RO'ları boyamaya başlamak için, fiksasyon sonrası sırasında mikrosantrifüj tüpündeki organoidlere daha önce eklenen osmiyum asidini çıkarmak için bir pipet kullanın. Daha sonra, RO'ları pH 7.4'te 0.01 molar PBS ile her biri 10 dakika boyunca üç kez yıkayın, ardından her biri 10 dakika boyunca üç kez deiyonize su ile yıkayın. Son deiyonize su yıkamasını çıkarın, yaklaşık 150 mikrolitre uranyum asetat ile değiştirin ve oda sıcaklığında bir ila iki saat lekeleyin.
Ardından, bir çeker ocakta, uranyum asetatı çıkarın ve numuneleri 10 dakika boyunca kurutmak için bir mililitre %50 aseton ile değiştirin. Ardından, her biri 10 dakika boyunca art arda %70, %80, %90 ve iki kez %100 aseton kullanarak gradyan dehidrasyonu gerçekleştirin. Gradyan dehidrasyonundan sonra, kalan asetonu atın ve yaklaşık 150 mikrolitre aseton ve Epon-812 reçinesi karışımı ekleyin.
Tüpü bir saat boyunca 37 derecelik bir fırına koyun. Önceki aseton-reçine karışımını çıkardıktan sonra, farklı bir aseton ve Epon-812 reçine karışımı bileşimi ile değiştirin. Bu sefer, tüpü gece boyunca 37 santigrat derecede inkübe edin.
Son olarak, retinal organoidleri dikkatlice yaklaşık 500 mikrolitre saf epoksi reçine içeren yeni bir tüpe aktarın. Ve organoid gömmeye devam etmeden önce bir saat boyunca 45 santigrat derecede inkübe edin.
