Başlamak için, bir makas ve künt forseps ile anestezi uygulanmış bir farenin derisini sağ juguler ven üzerinden kaldırın ve kesin. Deride, şah damarını ve çevresindeki dokuların bir kısmını açığa çıkaracak kadar büyük yuvarlak bir pencere açın. Künt diseksiyon tekniğini kullanarak yağ dokusunu, lenf düğümlerini ve bağ dokusunu nazikçe bir kenara itin.
Daha sonra, 20 mililitrelik bir şırıngayı 37 santigrat dereceye kadar ısıtılmış normal tuzlu su ile doldurun. Şırıngayı şırınga infüzyon pompasına yükleyin. Ardından 27 gauge kelebek iğneyi ve ilgili boruyu şırıngaya takın.
Delinmiş damar veya arterdeki kanı temizlemek için şırınga pompasını dakikada 0,5 mililitre akış hızına ayarlayın. Salin akışını birkaç mililitre delinme bölgesinin yanına yerleştirin ve doğrudan üzerine değil. Şah damarı temizlendikten sonra zamanlayıcıyı başlatın.
Juguler ven ve femoral arter için sırasıyla 30 gauge ve 33 gauge hipodermik iğneler edinin. Eğimi yukarı bakacak şekilde çevirin. Ardından iğneyi juguler ven veya femoral arter üzerine 25 derecelik bir açıyla yerleştirin.
Zamanı not ettikten sonra, kabın üst kısmını hızlı bir şekilde delin. Kanamanın tamamen durması için geçen süreye dikkat edin. Perfüzyon fiksasyonuna başlamadan önce trombüs oluşumunu bekleyin.
Perfüzyon tamamlandıktan sonra, juguler venin bir kısmını ponksiyon bölgesi ve trombüs ile inceleyin. Damar segmentinin distal ucu boyunca çapraz bir kesim yapmak için bir çift keskin makas kullanın ve damar segmentinin proksimal ucu boyunca düz bir kesim yapın. Daha sonra, sabit dokuyu 24 saat boyunca dört santigrat dereceye yerleştirin.
Ertesi gün, sodyum kakodilat tampon çözeltisini beş milimetre kalınlığında bir silikon mat içeren 35 milimetrelik bir kültür kabına dökün. Dokuyu dikkatlice tampona aktarın ve tampona batırıldığından emin olun. Paslanmaz çelik minutien pimleri ve bir çift ince forseps ile, kabın her iki ucunu dikkatlice paspasa sabitleyin.
Şah damarını dikkatlice temizleyin. Bir çift mikro makasla, delinme bölgesinin karşısındaki damar duvarını uzunlamasına kesin. Kabı yavaşça açın, ardından intralüminal tarafı yukarı bakacak şekilde silikon matın üzerine sabitleyin.
Tampon çözeltisini tabaktan çıkarın. Daha sonra kabı daldırmak için% 1 paraformaldehit ekleyin. Kurumasını önlemek için kapağı hemen tabağın üzerine yerleştirin.
