Başlamak için, kültürlenmiş özofagus düz kas hücrelerini% 80 co akıcılığına ulaştıklarında alın. Ortamı aspire edin ve endotelyal düz kas hücrelerini beş mililitre PBS ile yıkayın. Daha sonra şişeye iki mililitre% 0.2 Tripsin-EDTA ekleyin ve hücreleri sindirmek için iki dakika inkübe edin.
Sindirim işlemini sonlandırmak için iki mililitre DMEM ekleyin ve hücre süspansiyonunu 15 mililitrelik bir santrifüj tüpüne aktarın. Tüpü 675G'de üç dakika santrifüjleyin. Süpernatanı dikkatlice aspire edin ve hücre peletini kompozit jelatin metakrilat ve ipek fibroin metakriloyl biyomürekkeplerinde yeniden süspanse edin.
3D özofagus kas tabakasını PBS ile biyo-baskı yaptıktan ve yıkadıktan sonra, PBS'yi dikkatlice aspire edin ve% 10 FBS ve% 1 penisilin veya streptomisin ile desteklenmiş üç mililitre DMEM ile değiştirin.