Biyofilm Üretimi için Mycobacterium smegmatis Kültürü

Başlamak için, serolojik bir pipet ile iki mililitre otoklav lizojeni et suyu ortamını iki steril 14 mililitrelik test tüpüne dağıtın. laminer bir başlık içinde. Bir mikro pipet ile test tüplerine %5 oranında sterilize edilmiş 20 mikrolitre filtre ekleyin.

Daha sonra, Mycobacterium smegmatis'in kriyostokunu bir aşılama halkası olan bir tüpe ekleyin. Tüpleri bir çalkalayıcı inkübatörde dakikada 300 dönüş ve 37 santigrat derecede 48 saat inkübe edin. İkincil kültürleri hazırlamak için, iki mililitre otoklav lizojeni et suyu ortamını iki steril 14 mililitrelik test tüpüne dağıtın.

Ardından, test tüplerine %5 oranında sterilize edilmiş 20 mikrolitre filtre eklemek için bir mikro pipet kullanın. Daha sonra, bir mikro pipet ile, birincil kültürün 20 mikrolitresini tüplerden birine aktarın. Kültürleri, dakikada 300 dönüşte ve 37 santigrat derecede, 0.6 ila 0.8 arasında bir OD600'e ulaşana kadar çalkalayan bir inkübatörde inkübe edin.