Başlamak için, izole edilmiş akciğer hücrelerine 50 mikrolitre anti-fare CD90.2 mikroboncuk ekleyin. Karışımı girdapladıktan sonra, dört santigrat derecede 10 dakika inkübe edin. Ardından, bir veya dört konumlu hücre ayırma mıknatısına bir paramanyetik hücre ayırma sütunu yerleştirin.
Akışı yakalamak için her sütunun altına açık bir 15 mililitrelik konik boru yerleştirin. Kolonu üç mililitre soğuk ayırıcı tamponu ile astarlayın ve kolonun yerçekimi ile aşağıdaki konik boruya akmasına izin verin. Hücreler mikro boncuklarla 10 dakika inkübe edildikten sonra, bir mililitrelik bir hacme soğuk sıralayıcı tamponu ekleyin ve karışımı kolonun üzerine yerleştirilmiş 100 mikrometrelik bir hücre süzgecinden geçirin.
Kolon akışını, kolonun altına yerleştirilmiş 15 mililitrelik yeni bir konik tüpe toplayın. Hücre süspansiyonu kolondan tamamen boşaldığında, orijinal tüpe üç mililitre daha soğuk sıralayıcı tamponu ekleyin ve süzgeci çıkarmadan önce ağ boyunca kolona uygulayın. Numune kolona tamamen boşaldığında ve başka bir akış çıkmadığında, kolonu mıknatıstan çıkarın ve 15 mililitrelik yeni bir konik tüpün üzerine yerleştirin.
Sütuna beş mililitre soğuk sıralayıcı tamponu ekleyin. Bağlı hücreleri çıkarmak için, kolon pistonunu tek bir sürekli hareketle aşağı doğru itin ve tamponu alttan yeni bir tüpe zorlayın. Ayrıştırılan numuneleri 400 x g'da dört santigrat derecede beş dakika santrifüjleyin.
Süpernatanı dikkatlice aspire edin, yaklaşık 100 mikrolitre süpernatan ve hücre peleti bırakın. Ortalama olarak, zenginleştirme işlemi, tüm CD90.2 pozitif T hücrelerinin %99'undan fazlasını akciğerlerden %90'dan fazla saflıkla geri kazanır.
