Murin Örneklerinde Mitokondriyal Solunumu Ölçmek için Yüksek Çözünürlüklü Respirometri Cihazının Kalibrasyonu

Başlamak için, yüksek çözünürlüklü respirometriyi ve vakum sistemini açın. Tıpaları çıkarın ve ardından bir vakum sistemi kullanarak %70 etanol depolama solüsyonunu çıkarın. Hazneyi ultra saf moleküler dereceli suyla doldurun.

Son yıkamadan sonra, her odaya kreatin veya blebbistatin içermeyen iki mililitre MiRO5 ekleyin. Respirometri yazılımını açın. Açılır kutuda, hazne karıştırma hızını 750 rpm'ye, sıcaklığı 37 santigrat dereceye ve veri kayıt aralığını iki saniyeye ayarlayın.

Oksijen sensörleri için kazancı bire ve polarizasyon voltajını 800 milivolta ayarlayın. Cihazla iletişim kurmak için Oxygraph'a Bağlan'a tıklayın. İstenen iletişim kutusunda, deneysel dosyayı mevcut veriler ve kalibrasyon ile adlandırın ve kaydedin.

Odaların ısınmasına izin vermek ve hava kalibrasyonu sinyallerini kaydetmek için oksijen konsantrasyonunu en az 30 dakika boyunca kaydedin. Kalibrasyonun sonunda, shift tuşunu ve sol fare düğmesini basılı tutun ve sabit bir oksijen konsantrasyonu bölgesini işaretlemek için zaman çizelgesinde bir bölge boyunca sürükleyin. Oxygraph'a ve ardından Oksijen Kalibrasyonu'na gidin.

Hava kalibrasyonu için kararlı oksijen konsantrasyonu işaretini seçin ve Kalibre Et ve Panoya Kopyala'ya tıklayın. Hava kalibrasyonu kaydını durdurun ve dosyayı kaydedin.