Başlamak için, MEA platformunun yakınındaki bir kantara platin bir arp yerleştirin. Ardından, hidrofobik eğilimlerini azaltmak için arpı yaklaşık üç mililitre aCSF ile örtün. Bir transfer pipetinin dar ucundan yaklaşık 1,5 inç kesmek için makas kullanın.
Ardından, dilim tutma odasından bir beyin dilimi almak için değiştirilmiş pipeti kullanın. Beyin dilimini ve pipetteki herhangi bir çözeltiyi nazikçe çip kuyusuna dağıtın. Dilimi düzgün bir şekilde konumlandırmak için, çözeltide beyin dilimini kayıt elektrotlarının üzerine iten bir akım oluşturmak için yumuşak bir boya fırçası kullanın.
Forseps kullanarak, dilimi kayıt elektrotlarının üzerine bastırmak için arpı iplikler aşağı bakacak şekilde beyin diliminin üzerine nazikçe yerleştirin. Arpı, çerçevesiz tarafı giriş iğnesine bakacak ve arpın çerçevesi kayıt elektrotlarının hiçbirine temas etmeyecek şekilde yönlendirin. Şimdi atılan bir pipet alın ve fazla aCSF'yi çıkarın.
Ardından antistatik bir mendil alın, bir uç oluşturmak için bir köşeyi çevirin ve kayıt elektrotlarına, beyin dilimine veya arpa dokunmadan kayıt elektrotlarını çevreleyen kalan aCSF'yi emmek için kullanın. Belirlenmiş bir aCSF pipeti kullanarak, beyin dilimini kaplamak için hızlı bir şekilde yaklaşık iki mililitre karbojene aCSF ekleyin. Kuyuyu, kabaca dörtte üçü dolana kadar yaklaşık üç mililitre karbojene aCSF ile doldurun.
Ardından, MEA çipi üzerindeki beyin diliminin yüksek çözünürlüklü bir resmini çekmek için bir mikroskop veya kamera kullanın. Giriş ve çıkış borularını aCSF ile doldurulmuş behere yerleştirin. Giriş iğnesini kayıt elektrotlarının hemen dışına, çip kuyusunun altına yakın bir yere yerleştirin.
Ardından, çıkış iğnesini çipin üst kısmına yakın, kenara doğru yerleştirin, böylece sıvı neredeyse çip kuyusunun ağzına kadar, yaklaşık dört mililitre yükselir. Şimdi perfüzyon girişini dakikada beş mililitreye ve perfüzyon çıkışını dakikada yedi mililitreye ayarlayın. Giriş ve çıkış akışını açın.
Giriş iğnesini, hava yerine çözelti çıkarmaya başlayana kadar talaş kuyusundan çıkarın. Bundan sonra, iğneyi tekrar çipin içine iyice yerleştirin. Ardından, çözeltiyi fizyolojik sıcaklıkta, yaklaşık 34 ila 37 santigrat derece arasında tutmak için bir çözelti ısıtıcısı kullanın.
aCSF'nin 10 dakika boyunca beyin dilimi üzerinde perfüze olmasına izin verin. 10 dakika geçtikten sonra, çıkış borusunu atılan behere taşıyın. Daha sonra giriş tüpünü pro-konvülsan çözeltiyi içeren behere hareket ettirin.
Konvülsan olmayan aCSF'nin perfüzyon sisteminden 10 dakika boyunca atılan behere atılmasına izin verin. Son olarak, çıkış tüpünü pro-konvülsan çözeltiyi içeren behere aktarın ve deney bitene kadar dönmesine izin verin. Hem sıfır magnezyum hem de 4-aminopiridin paradigmaları altında neokortikal bölgelerde güçlü elektrografik nöbet benzeri aktivite sıklıkla gözlenmiştir.
Hipokampal bölgeler, beyin dilimleri arasında daha fazla değişkenlik gösterdi, bazıları nöbet benzeri aktivite gösterdi ve diğerleri geçici akıntılar gösterdi. Sıfır magnezyum paradigması altındaki neokortikal aktivite, 4-aminopiridin paradigmasına kıyasla çoklu frekans bantlarında daha yüksek güç gösterdi. Sıfır magnezyum paradigmasındaki hipokampal aktivite, 4-aminopiridin paradigmasındaki neokorteks ve her iki beyin bölgesine kıyasla yüksek gama frekans bantlarında daha yüksek güç göstermiştir.
