Başlamak için, sindirilmiş tümör dokusu örneğini alın ve kırmızı kan hücrelerini bitleyin. Numuneyi 450G'de dört santigrat derecede beş dakika santrifüjleyin. Ortamı çıkardıktan sonra, peleti izolasyon ortamının bir mililitresinde yeniden süspanse edin.
Santrifüjlemeyi tekrarladıktan sonra, peleti 100 mikrolitre izolasyon ortamında yeniden süspanse edin. 100 mikrolitre numuneyi 0,2 mililitrelik bir PCR şerit tüpünün kuyusuna aktarın. Bir biyogüvenlik başlığında, numuneye 10'ar mikrolitre annexin V kokteyli ve biotin selection kokteyli ekleyin.
Pipet, çözeltiyi karıştırın ve oda sıcaklığında dört dakika inkübe edin. Ardından, dekstran kaplı manyetik parçacıkları 30 saniye boyunca girdaplayın. Numune ile 20 mikrolitre boncuk ve 60 mikrolitre izolasyon ortamını karıştırın.
Üç dakika sonra, şerit tüpünü oda sıcaklığında beş dakika boyunca yüksek ayarda 10x Genomics manyetik ayırıcıya yerleştirin. Ardından, boncukları bozmadan sıvıyı şerit tüpünden yeni bir 1,5 mililitrelik düşük bağlamalı mikro santrifüj tüpüne aktarın. Tüpü daha önce gösterildiği gibi santrifüjleyin ve peleti, pelet boyutuna bağlı olarak uygun bir PMI ortamı hacminde yeniden süspanse edin.
Son olarak, bir hemositometredeki hücreleri sayın. Ölü hücre uzaklaştırıldıktan sonra, canlı hücre sayısı 4.9 kez 10 ila mililitre başına 5 gücündeydi ve canlılık %90'ın üzerindeydi
