Başlamak için, mikropipet çekiciye bir mikropipet yerleştirin ve bir mikroenjeksiyon iğnesi çekin. İğne ucunu, bir diseksiyon kapsamı altında sahne mikrometresinin bölümleriyle hizalayın. Mikrometreyi bir ölçüm kılavuzu olarak kullanarak, iğneyi hücrenin çapından biraz daha büyük bir delik boyutuna kırmak için keskinleştirilmiş bir forseps çifti kullanın.
Pipet dolgusu ile donatılmış 50 mililitrelik bir şırınga kullanarak, iğneyi tamamen mineral yağ ile doldurun. Nakil aparatında, üç vanayı, uzun kolu mikroşırınga pompasına bakacak şekilde çevirin. Hidrolik hattaki tüm hava kabarcıklarını temizlemek için rezervuar şırınga pistonuna basın.
Piston üzerindeki hafif basıncı koruyarak, üç vanayı, uzun kol şimdi rezervuar şırıngasına bakacak şekilde çevirin. Ardından iğneyi hava kabarcıkları oluşturmadan tutucuya yerleştirin. İğneyi, yataydan 10 ila 15 derecelik bir açıyla doğrudan sola bakacak şekilde ayarlayın.
Kaba ve ince mikromanipülatörleri kullanarak, odak noktasına getirmek için iğne ucunu mikroskop objektifinin altında hareket ettirin. Sıvı iğne ucunun içine veya dışına akıyorsa, yağ ile RPT arasında stabil bir menisküs gözlenene kadar şırınga pompasını kullanarak basıncı ayarlayın. Bir yağ kabarcığı kalırsa, ucunu RPT'den çekmek için iğneyi sağa, ardından yeniden konumlandırmak için tekrar sola hareket ettirin.
Donör hayvan tekrar görüş alanına getirilene kadar sahneyi sağa hareket ettirin. İğneyi hayvanın hemen dışındaki hücrelerle hizalayarak nakledilecek hücreleri yeniden merkezleyin ve onlara odaklanın. Daha sonra, iğneyi donör hayvana yerleştirin ve gerekirse iğne ucundaki yağ menisküsünü mikroşırınga pompası ile yeniden stabilize edin.
İğne ucunu ilgilenilen hücrelere doğru konumlandırın ve mikroşırınga pompası ile hafif emme uygulayın. Yeterli hücreleri aldıktan sonra, iğneyi donörden çıkarın ve iğne ucundaki materyali yeniden stabilize edin. İlk ev sahibi hayvanı görünüme/Merkeze getirmek için sahneyi yeniden konumlandırın ve hücrelerin yerleştirileceği alana odaklanın ve iğneyi hayvanın hemen dışındaki bu bölgeyle hizalayın.
Daha sonra iğneyi konakçı hayvana yerleştirin ve iğne ucundaki yağ menisküsünü yeniden stabilize edin. İğne ucunu biriktirme bölgesine yerleştirin ve iğneden doğru sayıda donör hücresi salınana kadar mikroşırga pompası ile hafif bir basınç uygulayın. Son olarak, iğneyi konakçıdan çıkarın.
Transplantasyondan 12 saat sonra, konakçının vagus motor çekirdeğinin ön bölgesinde sağlıklı nörit çıkıntıları belirtileri gösteren bir donör nöron başarıyla gözlendi. Transplantasyondan iki gün sonra, nakledilen nöron sadece doğru şekilde konumlandırılmakla kalmadı, aynı zamanda dördüncü faringeal kemere doğru yeni bir akson uzatmaya başladı ve bu da konakçı içinde başarılı bir entegrasyon olduğunu gösteriyor.
