The authors have no acknowledgements.

Protokolü geliştirmek için gerekli deneyler ulusal kurallara uygun yapılmış ve Turin, Torino, İtalya&#39;nın Üniversitesi kurumu bünyesinde faaliyet, yerel etik bilim komitesi tarafından (Comitato di bioética di Ateneo) onaylanmıştır. 1. Hazırlık <ol><li> Anestezi <ol><li> Bunu uyutmak için uygun izofluran odasının içine hayvan yerleştirin. </li><li> 2 L&#39;lik bir gaz odası içinde% 2.5 bir konsantrasyonda veteriner kullanımı için karıştırılmış O 2 ve izofluran gaz bölmeyi doldurup sıçan uykuya dalmak için yaklaşık 3 dakika boyunca bekleyin. Bir ayak tutam tarafından anestezi etkisi kontrol edin. </li><li> Anestezi etkisi alır sonra, sıçan kaldırmak ve onu tartmak. </li><li> Onları korumak ve göz fizyolojik hidrasyon korumak için hayvanın gözleri suda çözünür göz jeli ince bir tabaka sürün. </li><li> Bir ultrason ve foto akustik görüntüleme istasyonu tezgah üzerinde fare aşağı yatırın. Benhızlı, anestezi etkisi korumak sabit anestezi akışı (izofluran% 2 oksijen 1 L / dk -2.5%) sağlayan uygun Maskenin içinde burun konumlandırmak için n emri. </li></ol></li><li> Hayvan Tıraş <ol><li> Kulakları ve boynu çevreleyen alanları kapsayacak şekilde dikkat, kafa yüzeyinde saç kremleri tutarlı bir tabaka sürün. Krem birkaç dakika hareket ve bir spatula ile hafifçe dışarı almak için izin verin. Usulca doğru cildi temizlemek için ıslak bir sünger ile tüm krem ​​artıkları çıkarın. NOT: Hayvan kürk böylece mutlaka mümkün olduğunca kaldırılacak olan, olumsuz ultrason tabanlı görüntüleme edinimi etkileyen hava hapseden. </li></ol></li><li> Hayvan yerleştirme <ol><li> Bir yayılma-kartal pozisyonda hayvan düzenleyin. (Varsa) tezgah üzerinde uygun hayati parametre sensörleri vasıtasıyla vital bulgularını, Monitör. Profesyonel kullanım için elektrot krem ​​birkaç damla uyguladıktan sonra sensörleri pençeleri yalın. NOT: aşağıdaki gibi anestezi sırasında, hayati parametreleri değerlerine sahip olun: sıçan vücut ısısı 37.5 ° C ≈, dakika (BPM) başına kalp atım dakikada 40-80 nefes aralığında oluşmaktadır 250 ve 350 ile solunum hızı arasında değişmektedir . </li><li> Nihayet hipoalerjenik yapay ipek yama ile bacaklarda sıkın. Gerekirse, hayvanın gözlerini korumak için tekrar suda çözünür göz jeli ince bir tabaka yayıldı. </li></ol></li></ol> 2. Görüntü View Zamansal Açısından Toplama <ol><li> Hayvan yerleştirme <ol><li> Bir pozisyonda hayvan tutulması sagital gövdesi eksenine göre yaklaşık 45 ° &#39;lik bir eğim açısına sahip yan tarafında hafifçe gövde dönerler. Doğru bertaraf (Şekil 2a) düzenlemek için duruyor gibi küçük pamuklu gazlı bez rulo kullanın. </li><li> Hayvan kafasını kaldırın ve bir tarafta (Şekil 2a) biraz döndürün. Burun kuyu INSER tutarak standı gibi bir pamuk rulo kullanınAnestezi maskesi içine ted. </li><li> Yatay düzleme göre yaklaşık 30 ° &#39;lik bir açı ile eğim tezgahı. </li><li> Dikey düzleme göre yaklaşık 30 ° &#39;lik bir açı ile bir görüntüleme dönüştürücüyü getirin. </li></ol></li><li> Ultrasonik ve foto akustik anatomik ve vasküler görüntü elde etme <ol><li> Üzerinde tarama görüntüleme açın B Modu görüntü elde etme girin ve düzgün deney (Şekil 3a) olası verilen gereksinimleri saygı tüm görüntü elde etme parametrelerini ayarlamak. Not: transdüktör için mümkün olan maksimum nüfuz etme derinliği için, mümkün olduğu kadar düşük iletim merkez frekansı (16 MHz, Şekil 3b) ayarlayın. </li><li> Hayvanın kafası (Şekil 2b) üzerine hipoalerjenik suda çözünür ultrason iletim jel (yaklaşık 1 cm kalınlığında) tutarlı bir tabaka atınız. Aynı jel ince bir tabaka ile dönüştürücü kafa Kapak ve ra tabaka ile temas içine koymakt. Lokalize hipotermi en aza indirmek için sıcak jel kullanın. </li><li> B modunda görüntü elde etme başlayın ve anatomik referanslar belirleyerek ve monitör orta noktaya ilgi bölgeyi merkez tarafından, gerçek zamanlı dönüştürücü konumlandırma ayarlayın. Onlar olumsuz etkileyebilir, çünkü satın alma, jel tabakası içine sıkışmış herhangi bir düzeyde hava kabarcıklarını ortadan kaldırmak için emin olun. </li><li> Optimal ışın odaklılığıyla elde etmek için göz (Şekil 4a) kulak bağlayan sanal eksene hizalamak için dönüştürücüyü yerleştirin. Saat yönünde veya saat yönünün tersine dönme (Şekil 4b ve c) iç beyin hacminin farklı görüşlere, Edinme. </li><li> Sonunda stabil bir ince bir şekilde konumunu ve yönünü ayarlamak için güvenli bir mekanik ayak üzerinde dönüştürücüyü sabitleyin. </li><li> Ilgi beyin bölgesi optimal pH&#39;ın almak için US-LASER dönüştürücü kaynağına göre derinliği 10 mm lokalize olduğundan emin olunotoakustik yanıt sinyali (Şekil 5). Sonra tam analiz alanın merkezinde ABD dalga odaklılığıyla bir göstergesi yerleştirin. NOT: ilgi alanları araştırma sırasında, konumlandırma prosedürü hızlandırmak amacıyla, solunum kapı seçeneği aktivasyonunu önlemek. </li><li> Bir yüksek duyarlı bir şekilde iç beyin kan damarları görselleştirmek için Renkli Doppler Modu giriniz. </li><li> Konumlandırma istediği bölgeleri görselleştirmek için uygun bir şekilde ayarlandıktan sonra, hareketi (Şekil 6a) ile ilgili istenmeyen etkileri önlemek için solunum kapısı seçeneğini etkinleştirin. </li><li> Renkli Doppler Modu (Şekil 6b) &#39;de istenen kazanım parametre setini seçin ve penetrasyon derinliği birkaç milimetre kadar, kan akışı hızları ve yönleri ayırt etmek, bu yöntemin görüntü elde. </li><li> Darbeli Dalga Doppler Modu girin ve arter kan nabız tespit görüntüleri kazanmak ve arterler a ayırt etmeknd damarlar. </li><li> Akış oranları değerlendirildi farklılıklar nedenle akı hareketinden kaynaklanan olayları saçılma sayısı temelinde bir sinyal ölçümü gerçekleştirmek için Power Doppler Modu ve set satın alma parametrelerini (Şekil 7) girin ve. </li><li> Belirli bir alanda kan total hemoglobin içeriğinin veya oksijenlenme derecesi hakkında veri toplamak için satın alma parametreleri (Şekil 8a) rafine düzgün foto akustik Modu girin ve. Bütün bir dalga boyu spektrumunda laser uyarma üreterek (680 nm ila 970 nm, Şekil 8b), bir doku içinde farklı kimyasal devletlerde toplam hemoglobin mevcut emme belirlenebilir. Tek bir belirli dalga boyu (Şekil 8c), sinyal toplama işleminin yapılması sureti ile, bunun nedeni oksi ve de-oksi saf türleri emilmesine farklı sinyal katılım izole etmek mümkündür. </li></ol></li></ol> View Oksipital Açısından 3. Görüntüleme <ol><li> Hayvan yerleştirme <ol><li> Yüzükoyun pozisyonda hayvan tutulması, hayvan kafa düşürmek ve yanal doğru bertaraf düzenlemek için duruyor gibi küçük pamuklu gazlı bez rulo kullanın. </li><li> Hayvan başı enine düzlemde (Şekil 9) Görüntüleme dönüştürücü paralel çevirin. NOT: Bu şekilde, satın alma kafatasının temelinde oksipital foramenden merkezli olacak. Prob oryantasyon (Şekil 9) eğilme açısını değiştirerek, bu ayar eğimine bağlı olarak farklı görünümlerde iç damar görüntüleri elde etmek mümkün olacaktır. </li></ol></li><li> Ultrasonik ve foto akustik anatomik ve vasküler görüntü elde etme <ol><li> Daha önce (Şekil 3) rapor ve prob ve hayvan ense gerekli ultrason jeli katmanları yaymak gibi B Modu görüntü elde etme girin, tüm görüntü elde etme parametrelerini ayarlamak. </li><li> Ord içinde, neredeyse yatay kalmak için dönüştürücüyü düzenleyinvücudun üst anatomik posterior kadar ön ekseni boyunca yönlendirilir. Burnu ön tarafına doğru yönlendirin ve hafifçe öne doğru eğin. </li><li> B Modu ve Renkli Doppler modunda görüntü elde etme başlayın (Şekil 3 ve 6). Doğru dönüştürücü konumunu ayarlamak ve daha önce açıklandığı gibi jel kaplama hava kabarcıklarını çıkarmak. Mümkünse, ince bir şekilde yönünü kontrol etmek ve istenen anatomik bölgelerin görüntülerini elde etmek için en iyi devirme açısı seçmek için bir firma stand dönüştürücüyü sabitleyin. </li><li> Düzgün kazanım parametrelerinin (Şekil 7) ayarlayarak Power Doppler Modu, iç beyin kan damarları gözünüzde canlandırın. </li><li> Darbeli Dalga Doppler Modu tarafından yoğun titreşen arterler yerelleştirilmesine. Tersine kan akımı nabız düşük seviyeleri ile karakterize olan damarlar, onları ayırt. </li><li> Yeterince ACQ uyarlayarak Renkli Doppler modunda, kan akışı hızları verilerini ve yön toplayınuisition parametreleri (Şekil 6). </li><li> Foto akustik satın alma yoluyla elde edilen kimyasal kan bilgisini (Şekil 8) ekleyerek Komple derin beyin hemodinamik karakterizasyonu veri seti. Bu, genel olarak, 750 ve 850 nm&#39;de (Şekil 8c), lazer dalgaboyu ayarlayarak ölçülür O2 doyma oranı ve toplam hemoglobin içeriği (HBT) gibi, özellikle kan gibi parametrelerin miktarın değerlendirilmesi ile bu gerçekleştirin. </li></ol></li></ol> Edinim ve Hayvan çıkarılması 4. Sonu NOT: Düzgün hayvana uygulanan anestezik dozu ile ilgili temel kısıtlamalara tabi görüntü elde etme süreci (adım 1 den 3. adıma), adanmış bütün zaman düşünün. <ol><li> Tüm edinilen verileri kaydetmek fotoakustik satın alma modundan çıkmadan lazer kapalı darbe açmak ve transdüser mesafe. </li><li> Ani korurkenanestezi etkisi altında mal, hafifçe ıslak pamuklu bir bez ile gözleri koruyucu jel kaldırarak temizlemek başlar. Daha sonra ıslak bir sünger ile temizleyin, tamamen kafa ve burun ultrason jeli kaldırmak için bir spatula ve birkaç kağıt havlu kullanın. Hassas tıraş cildi zarar vermemek için dikkatli olun. </li><li> Uzuvları tutturmak ve fizyolojik parametreleri izlemek sensörlerden onları kesmek için kullanılan yapışkan yama çıkarın. Hızla farklı bir kafese satın alma tezgah gelen hayvan aktarın. </li><li> Anestezi kurtarma için küçük bir kafeste hayvan barındırın. Hayvanlar çatışmaları önlemek amacıyla, bu faz esnasında kafes paylaşmamalıyım emin olun </li><li> Hayvan sıcak tutmak için bir kızılötesi ışık altında kurtarma kafesini yerleştirin. Sternal yatma korumak için yeterli bilinci yerine kadar bekleyin. Hayvancılık odasına geçmeden önce, hayvanların genel sağlık koşullarını kontrol edin. </li></ol>

<ol>
	<li>Bestmann, S., Feredoes, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combined+neurostimulation+and+neuroimaging+in+cognitive+neuroscience:+past,+present,+and+future.">Combined neurostimulation and neuroimaging in cognitive neuroscience: past, present, and future.</a> Ann N Y Acad Sci. 1296, 11-30 (1111).</li><li>Kim, S. A., Jun, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In-vivo+Optical+Measurement+of+Neural+Activity+in+the+Brain.">In-vivo Optical Measurement of Neural Activity in the Brain.</a> Exp Neurobio. 22 (3), 158-166 (2013).</li><li>Silva, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nanotechnology+approaches+to+crossing+the+blood-brain+barrier+and+drug+delivery+to.">Nanotechnology approaches to crossing the blood-brain barrier and drug delivery to.</a> the CNS.BMC Neurosci. 9, S4 (2008).</li><li>Stemmer, N., Mehnert, J., Steinbrink, J., Wunder, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+fluorescence+imaging+in+animal+models+of+stroke.">Noninvasive fluorescence imaging in animal models of stroke.</a> Curr Med Chem. 19 (28), 4786-4793 (2012).</li><li>Frohman, E. M., Fujimoto, J. G., Frohman, T. C., Calabresi, P. A., Cutter, G., Balcer, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+coherence+tomography:+a+window+into+the+mechanisms+of+multiple+sclerosis.">Optical coherence tomography: a window into the mechanisms of multiple sclerosis.</a> Nat Clin Pract Neurol. 4 (12), 664-675 (2008).</li><li>Liao, L. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurovascular+coupling:+in+vivo+optical+techniques+for+functional+brain+imaging.">Neurovascular coupling: in vivo optical techniques for functional brain imaging.</a> Biomed Eng Online. , 12-38 (2013).</li><li>Youn, H., Hong, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+Noninvasive+Small+Animal+Molecular+Imaging.">In vivo Noninvasive Small Animal Molecular Imaging.</a> Osong Public Health Res Perspect. 3 (1), 48-59 (2012).</li><li>Miyawaki, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A.Fluorescence+imaging+in+the+last+two+decades.">A.Fluorescence imaging in the last two decades.</a> Microscopy (Oxf). 62 (1), 63-68 (1093).</li><li>Feldman, M. K., Katyal, S., Radiographics Blackwood, M. S. U. S. a. r. t. i. f. a. c. t. s. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> 29 (4), 1179-1189 (1148).</li><li>Postema, M., Gilja, O. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contrast-enhanced+and+targeted+ultrasound.">Contrast-enhanced and targeted ultrasound.</a> World J Gastroenterol. 17 (1), 28-41 (2011).</li><li>Zacharatos, H., Hassan, A. E., Qureshi, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intravascular+ultrasound:+principles+and+cerebrovascular+applications.">Intravascular ultrasound: principles and cerebrovascular applications.</a> AJNR Am J Neuroradiol. 31 (4), 586-597 (2010).</li><li>Li, C., Wang, L. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photoacoustic+tomography+and+sensing+in+biomedicine.">Photoacoustic tomography and sensing in biomedicine.</a> Phys Med Biol. 54 (19), R59-R97 (2009).</li><li>Kim, C., Favazza, C., Wang, L. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+photoacoustic+tomography+of+chemicals:+high-resolution+functional+and+molecular+optical+imaging+at+new+depths.">In vivo photoacoustic tomography of chemicals: high-resolution functional and molecular optical imaging at new depths.</a> Chem Rev. 110 (5), 2756-2782 (2010).</li><li>Hu, S., Wang, L. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photoacoustic+imaging+and+characterization+of+the+microvasculature.">Photoacoustic imaging and characterization of the microvasculature.</a> J Biomed Opt. 15 (1), (2010).</li><li>Mallidi, S., Luke, G. P., Emelianov, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photoacoustic+imaging+in+cancer+detection,+diagnosis,+and+treatment+guidance.">Photoacoustic imaging in cancer detection, diagnosis, and treatment guidance.</a> Trends Biotechnol. 29 (5), 213-221 (2011).</li><li>Pysz, M. A., Gambhir, S. S., Willmann, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+imaging:+current+status+and+emerging+strategies.">Molecular imaging: current status and emerging strategies.</a> Clin Radiol. 65 (7), 500-517 (2010).</li><li>Nie, L., Cai, X., Maslov, K., Garcia-Uribe, A., Anastasio, M. A., Wang, L. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photoacoustic+tomography+through+a+whole+adult+human+skull+with+a+photon+recycler.">Photoacoustic tomography through a whole adult human skull with a photon recycler.</a> J Biomed Opt. 17 (11), (2012).</li><li>Huang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aberration+correction+for+transcranial+photoacoustic+tomography+of+primates+employing+adjunct+image+data.">Aberration correction for transcranial photoacoustic tomography of primates employing adjunct image data.</a> J Biomed Opt. 17 (6), (2012).</li><li>Nie, L., Guo, Z., Wang, L. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photoacoustic+tomography+of+monkey+brain+using+virtual+point+ultrasonic+transducers.">Photoacoustic tomography of monkey brain using virtual point ultrasonic transducers.</a> J Biomed Opt. 16 (7), (2011).</li><li>Guevara, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+of+an+inflammatory+injury+in+the+newborn+rat+brain+with+photoacoustic+tomography.">Imaging of an inflammatory injury in the newborn rat brain with photoacoustic tomography.</a> PLoS On. 8 (12), (2013).</li><li>Yao, J., Wang, L. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photoacoustic+Microscopy.">Photoacoustic Microscopy.</a> Laser Photon Rev. 7 (5), (2013).</li><li>Liu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+the+effects+of+norepinephrine+on+single+cerebral+microvessels+using+optical-resolution+photoacoustic+microscope.">Assessing the effects of norepinephrine on single cerebral microvessels using optical-resolution photoacoustic microscope.</a> J Biomed Opt. 18 (7), (2013).</li><li>Xia, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Whole-body+ring-shaped+confocal+photoacoustic+computed+tomography+of+small+animals+in+vivo.">Whole-body ring-shaped confocal photoacoustic computed tomography of small animals in vivo.</a> J Biomed Opt. 17 (5), 050506 (2012).</li><li>Sun, J., Lindvere, L., Van Raaij, M. E., Dorr, A., Stefanovic, B., Foster, F. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+imaging+of+cerebral+hemodynamics+using+high-frequency+micro-ultrasound.">In vivo imaging of cerebral hemodynamics using high-frequency micro-ultrasound.</a> Cold Spring Harb Protoc. (9), (2010).</li><li>Nasiriavanaki, M., Xia, J., Wan, H., Bauer, A. Q., Culver, J. P., Wang, L. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-resolution+photoacoustic+tomography+of+resting-state+functional+connectivity+in+the+mouse+brain.">High-resolution photoacoustic tomography of resting-state functional connectivity in the mouse brain.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 111 (1), 21-26 (2014).</li><li>Jao, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+photoacoustic+computed+tomography+of+mouse+brain+metabolism+in+vivo.">Noninvasive photoacoustic computed tomography of mouse brain metabolism in vivo.</a> Neuroimage. 64, 257-266 (2013).</li><li>Deng, Z., Wang, Z., Yang, X., Luo, Q., Gong, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+imaging+of+hemodynamics+and+oxygen+metabolism+in+acute+focal+cerebral+ischemic+rats+with+laser+speckle+imaging+and+functional+photoacoustic+microscopy.">In vivo imaging of hemodynamics and oxygen metabolism in acute focal cerebral ischemic rats with laser speckle imaging and functional photoacoustic microscopy.</a> J Biomed Op. 17 (8), 081415-081414 (2012).</li><li>Huang, R. B., Mocherla, S., Heslinga, M. J., Charoenphol, P., Eniola-Adefeso, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+and+cellular+interactions+of+nanoparticles+in+vascular-targeted+drug+delivery.">Dynamic and cellular interactions of nanoparticles in vascular-targeted drug delivery.</a> Mol Membr Biol. 27 (7), 312-327 (2010).</li><li>Saxer, T., Zumbuehl, A., M&#252;ller, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+shear+stress+for+targeted+drug+delivery.">The use of shear stress for targeted drug delivery.</a> Cardiovasc Res. 99, 328-3233 (2013).</li><li>Zhao, Y. Z., Lu, C. T., Li, X. K., Cai, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrasound-mediated+strategies+in+opening+brain+barriers+for+drug+brain+delivery.">Ultrasound-mediated strategies in opening brain barriers for drug brain delivery.</a> Expert Opin Drug Deliv. 10, 987-1001 (2013).</li></ol>

Bu yazı için yayın ücretleri Görsel Sonics tarafından desteklenmiştir.

Sunulan protokol küçük hayvanlarda yüksek oranda etkili beyin görüntüleme performans sağlamak için optimize edilmiştir. Görüntüler tam satın alma parametreleri ve kafatası foraminaya üzerindeki dönüştürücü konumlandırma hakkında göstergeler takip ederek farklı modaliteleri de elde edilebilir. ABD ve lazer doğru oksipital bir daha küçük foramen nüfuz mümkün olduğunca açık merkezli sahip olduğundan, özellikle, zamansal tarafında konumlandırılması, en çok önemlidir. Yine, bu deneysel ortamda sayesinde, fizyolojik ya da patolojik yarışmalar ile ilgili hemodinamik özellikleri erişilebilir ve hatta genellikle karakterize etmek zor derin beyin bölgelerinde, değerlendirilebilir. Başarılı görüntü elde etme dönüştürücü konumlandırma doğruluğuna bağlıdır beri, bu bağımlılık da görüntüleme performansını etkileyebilir, çünkü dikkatli dikkate alınmalıdır. Örneğin,ilgi bazı anatomik yapılar tamamen satın alma görüntüleme düzlemi ve optimal neden olabilir sadece kısmi bir vizyon sunan görüntüleri kendi kimlik dahil değildir olabilir. Bu, önceden belirlenmiş bir otomatize edilmiş bir yol boyunca hareket ettirmek için azaltıcı gerektirir Dahası, üç boyutlu bir yöntemi (3D Mod) gerçekleştirilen bir ABD ve PA görüntüleme elde edilmesi, daha önce tarif edilen deneysel ortamda uyumlu değildir olacaktır. Son olarak, bağlı doğal anatomik değişkenlik, kafatası açıklıklarının boyutu önemli ölçüde, hayvanlar arasında değişebilir ve böylece satın alma sürecinde öngörülemeyen yansımaları olan. Bu durum, her bireyin özelliklerine görüntü kalitesi bağımlı hale getirir. Sonuç olarak, imkansızlık deneysel protokol tasarlarken dikkat edilmesi gereken bazı hayvanlara bu stratejiyi uygulamak için. Özellikle, dikkate değer bir ilgi nedeniyle belirlenmesinde onun temel rolü, hemodinami yöneliktirSistemik uygulama, 28-29 sonra ilaçlar veya diğer dış kaynaklı moleküllerin biyolojik dağılım. Moleküler Görüntüleme alanında uygulamalı etkileri ultrason indüklemeli BBB açıklığı 30 gerektiren görüntü izlenen ilaç verme çalışmalara kan havuzu görüntüleme kontrast ajanları doğrulama kadar çoktur. Bu araştırma amaçlı Bütün kesinlikle herhangi bir ek ameliyat olmadan, ölüm veya istenmeyen yan etkilerin riski önemli ölçüde azalır ve aynı hayvan modellerinde uzun süreli izleme mümkün olduğunu, düşünüyor protokol, minimal invaziv yararlanacaktır. Özetle, sunulan protokol verimli görüntü ve doğru anatomik topografya ve araştırma kullanımı, hayvan modellerinde normal veya patolojik beyin dokularının vasküler desen yorumlamak uygulayıcısı sağlayacaktır. Mevcut yöntemler özellikle kortikal görüntüleme 25-27 tomografi ile sınırlı iken, bu ayar fırsatı t veriro hem ABD ve PA görüntüleme tarafından sağlanan avantajlar birleştirerek, derin beyin fizyolojisi etkileyen çeşitli işlemleri açıklamaktadır.

Inceden küçük hayvanların merkezi sinir sisteminde beyin hemodinamiklerinin özelliklerini tanımlamak için Stratejiler sinirbilimin 1-3 alanını ilerlemek için ihtiyaç vardır. sunulan tekniği vasküler biyoloji, düzenleme ve işlevini incelemek amacıyla küçük hayvan beyne noninvaziv akustik ve foto akustik görüntüleme gerçekleştirmek için nasıl gösterir. Optik görüntüleme teknikleri nöral aktivitenin 2,4-5 ilgili olayların lokalizasyonu izin ve aynı anda hem oksijenli ve olmayan oksijenli devletlerin 6 hemoglobin tarafından üretilen sinyalleri kazanır. Ancak, fotonik emilimi ve saçılma, saf optik görüntüleme kötü uzaysal çözünürlüğü ve sınırlı doku penetrasyon derinliği 7-8 muzdarip. Tersine, akustik yüksek alan uzaysal çözünürlüğü ile derin görüntüleme gerçekleştirmek için fırsat sunuyoruz, ama benek ve sınırlı kontrast 9-11 tarafından engellenmektedir. Fotonik wi özelliklerini birleştirerekultrason inci, foto akustik tekniği görüntüleme ve tek yöntemlerin 12-16 teşhis potansiyellerini hem geliştirir. Beynin fotoakustik görüntüleme nörobiyolojisinde birden soruları aydınlatmak potansiyeline sahiptir, ancak, doğal dramatik, encephalon korur fotonik ve ultrasonik doku penetrasyonu 17-19 sınırlandıran takke. Ayrıca, kemikler duyarlılık ve görüntü sapmaları 17-18 kaybına neden ışık ve ses hem saçılmasını teşvik. Sonuç olarak, beyin ultrasonik ve foto akustik görüntüleme kolayca önce kemikleşme 20 yenidoğan hayvanlar üzerinde yapılan, ancak yetişkin beynin derin anatomisi ve fizyolojisi, sadece kraniotomi 21,22 sonra açıkça erişilebilir olabilir. Ne yazık ki, kafatası kaldırılması için gerekli cerrahi teknik sert ve etkileri bazı deneysel amaçlar böylece nöral hastalığın ilerlemesini izlemek için zor yapmak için zararlı olabilirzamanla aynı hayvan. Bu nedenle, küçük hayvan modellerinde görüntü derin beyin biyoloji için invazif olmayan bir yöntem arzu edilmektedir. Literatürde foton çöp 17&#39;ye ait metot telefon kaybını azaltmak ve gürültü oranında (SNR) ve hedefin kontrast foto akustik sinyali geliştirmek, sağlam kafatası yoluyla geçirgenliği artırmak için bir yol olarak rapor edilir. sunulan protokol, herhangi invaziv cerrahi olmadan (özellikle fareler üzerinde) araştırma kullanım kemirgenler üzerinde subkortikal beyin akustik ve foto akustik görüntüleme için güvenilir bir yöntem sağlamaktır. işlem yüksek frekanslı ultrason ve foto akustik görüntüleme için taşınabilir nakleden cihazların kullanımına dayanmaktadır. Buna karşılık görüntüleme teknolojisi 23, taşınabilir ve 24 doğal azaltılmış kalınlıkta özel kafatası bölgelerin seçilmesine olanak tanır yönlü transdüserlerini tomografik, çatlaklar veya scissures olarak adlandırılan. omurgalı a mevcut büyük yarıklar (foramen)Nimal kafatası vücudun diğer bölgelerinde iç encephalon devreleri bağlama sinir demetlerini, gemi veya diğer yapıların bulmak için gereklidir. büyük yarıklar ultrason dalgaları ve lazer için özel geçişleri olarak yararlanılabilir farklı büyüklükte kemik açıklıklar bulunmaktadır. Böyle hedeflenen görüntüleme, kemik arayüzleri neden dalga yansıma etkilerini azaltır ve görüntüleme penetrasyon derinliğini artırarak hassasiyeti arttırır. Bu perspektifte, görüntüleme dönüştürücü bu alanlarda ultrason ve fotonik kirişler maksimum yakınsama amacıyla, zamansal ve kafatası (Şekil 1) oksipital tarafında bulunan yarıkların dik olarak düzenlenebilir. Her iki Bu yönelim sinyal kalitesini artırır ve diğer kranial yönelimlere göre bir ince kemik tabakası ile devam sinyali zorlar. Böylece, iletilen ve yansıyan dalgalar derin kaynaklanan yoğun sinyallerin toplanmasını sağlayan, saçılma düşük derecede maruzdoku tabakaları. Başka ameliyat gerekli ise önceki prosedürleri aksine, bu deneysel ayar, sadece hayvan kafa tıraş gerektirir. Önerilen protokol ile, görüntüleme, hem özel referans anatomik yapılar ve sanat yöntemlerinin mevcut durumu daha derin kan damarları, hayvan derisi ve kafatası sağlam kalır tüm süre açığa nispeten yüksek uzaysal çözünürlükte yapılır. Benzersiz koronal ve aksiyel görüntüler foto akustik görüntüleme paralel olarak çeşitli ultrasonik görüntüleme yöntemleri edinim (B, Power Doppler, Renkli Doppler, darbeli Dalga Modu) istismar ederek elde edilebilir. Parametrelerin uzun bir repertuarı kan dolaşımı dinamiklerini etkileyen özellikleri bir bütün koleksiyonu yanında parankimal ve vasküler anatomi tasviri sağlayan, bu görüntüleri elde edilebilir. Bu protokol, Yüksek Frekans Ultrasonik B Modu modalitesi, baziler ve internal karotid arter (görüntü temel kortikal parankima özellikleri kullanılabilirWillis Çemberi oluşturan BA ve ICA sırasıyla), Orta Serebral Arter (MCA) ve dolaşım aparatın diğer detaylar. Ayrıca, kan akımı ölçümü, akış hızları, yön hareket açıklamasını ve oksijen doygunluğu verileri ortalama derin beyin bölgelerine kortikal alınabilir. Bu yeni strateji, çeşitli uygulamalar için büyük bir potansiyele sahiptir ve çeşitli patolojiler çok önemli olan derin beyin özelliklerini tasvir güvenilir prosedürler için acil ihtiyaç karşılar. Ayrıca, çünkü onun minimal invaziv ve sunulan protokol, merkezi sinir sistemi üzerinde sayısız olası görüntüleme çalışmaları, uzun süreli izleme gerektiren veya hassas patolojik hayvan modelleri içeren özellikle de etkinleştirebilirsiniz.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="979">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Name of Reagent/ Equipment</td>
			<td style="width:180px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:464px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">High frequency ultrasound and photoacoustic imaging station (VEVO LAZR 2100 system)&#160;</td>
			<td>FUJIFILM VisualSonics Inc.</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Vevo Compact Dual Anesthesia System (Tabletop Version)&#160;&#160;</td>
			<td>FUJIFILM VisualSonics Inc.</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>http://www.visualsonics.com/anesthesiasystem#sthash.opODt 
			Sht.dpuf</td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:216px;">Ultrasound Transmission Gel (Aquasonic 100)</td>
			<td style="width:180px;">PARKER LABORATORIES INC.</td>
			<td style="width:119px;">01-08</td>
			<td>http://www.parkerlabs.com/aquasonic-100.asp</td>
		</tr>
		<tr height="231">
			<td height="231" style="height:231px;width:216px;">Sprague-Dawley rats</td>
			<td style="width:180px;">&#160;Charles River Laboratories</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:464px;">Three helathy 6-weeks old Sprague-Dawley rats were purchased by Charles River Laboratories and kept in standard housing (12 h light-dark cycles) with a standard rodent&#160; chow and water available ad libitum. Provided by: http://www.criver.com/</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

non-invasive parenchymal, vascular and metabolic high-frequency ultrasound and photoacoustic rat deep brain imaging

Photoacoustics and high frequency ultrasound stands out as powerful tools for neurobiological applications enabling high-resolution imaging on the central nervous system of small animals. However, transdermal and transcranial neuroimaging is frequently affected by low sensitivity, image aberrations and loss of space resolution, requiring scalp or even skull removal before imaging. To overcome this challenge, a new protocol is presented to gain significant insights in brain hemodynamics by photoacoustic and high-frequency ultrasounds imaging with the animal skin and skull intact. The procedure relies on the passage of ultrasound (US) waves and laser directly through the fissures that are naturally present on the animal cranium. By juxtaposing the imaging transducer device exactly in correspondence to these selected areas where the skull has a reduced thickness or is totally absent, one can acquire high quality deep images and explore internal brain regions that are usually difficult to anatomically or functionally describe without an invasive approach. By applying this experimental procedure, significant data can be collected in both sonic and optoacoustic modalities, enabling to image the parenchymal and the vascular anatomy far below the head surface. Deep brain features such as parenchymal convolutions and fissures separating the lobes were clearly visible. Moreover, the configuration of large and small blood vessels was imaged at several millimeters of depth, and precise information were collected about blood fluxes, vascular stream velocities and the hemoglobin chemical state. This repertoire of data could be crucial in several research contests, ranging from brain vascular disease studies to experimental techniques involving the systemic administration of exogenous chemicals or other objects endowed with imaging contrast enhancement properties. In conclusion, thanks to the presented protocol, the US and PA techniques become an attractive noninvasive performance-competitive means for cortical and internal brain imaging, retaining a significant potential in many neurologic fields.

Bu yöntem görüntünün hem hayvan deri ve kafatası sağlam mevcut tekniğe göre daha derin nispeten yüksek uzaysal çözünürlüğü, anatomik referans yapıları ve kan damarları belirli izin verir. Bizim deneysel koşullarda PA sinyalinin derinliği 4.5 mm ve eksenel çözünürlük FOV 23 x 15.5 cm 75 mm. Foto akustik Tomografi yöntemi 19 Deneyler çözünürlüğü &lt;1 mm değeri gösterdi. SNR değerleri aralığı 21.6 dB den (rastgele beyin dokusu ve arka planda seçilen 5 farklı puan elde) 23.8 dB olduğunu. Kafatası zamansal tarafta dönüştürücüyü yanyana koyarak beyin görüntüleri bir görüş ortaya çıkan yanal görüntüleme noktası (Şekil 4) ile transdüser seçilen konumlandırma açısı temelinde enine ya da koronal kesitler olarak elde edilebilir. Bunlar büyük ölçüde ac açısından farklılık gibi Epidermis, kafatası kemikleri ve parankimal malzeme iyi, ultrasonik B-Mode temsil edilmektediroustic impendence (Şekil 10). Kendi yapılandırma bakış seçilen noktasına bağlıdır bile, parankiminde bazı anatomik referans siteler gibi beyin korteks iç kısmını ve karakteristik şeklinde optik yolu (Şekil 10) ayıran çatlaklar gibi, tanınabilir. Ayrıca, gemilerin çok sayıda ultrasonik ve foto akustik görüntüleme yöntemleri hem görebilir. Hayvanın beyin dış yan yüzeyi boyunca çalışan diğer ana büyük gemiler ile İç Karotis Arter (ICA) Karakteristik kavşaklar kolaylıkla tanınabilir. Böyle ICA gibi büyük damar yolları, enerji ve oksijen tutarlı nöronal ihtiyacını karşılamak için büyük bir kan dolaşımı sağlar. ICA, Ortak Karotis Arter (CCA), derinlik birkaç milimetre başın yan tarafında çalışan kaynaklı, tüm çatallanma siteleri ötesine gider ve nihayet frontal baş kısmını ulaşır. Bu ana kan akışı intermedi arasında yayılıryedi-boyutlu gemiler, nihayet nöronlar besleyen her zaman küçük arteriyollerde kanalize önce. Bakış zamansal açıdan, ön ve yan beyin tarafına yönelik gemilerin üzere iki kola ayrılır İç Serebral Arter desen, izlemek mümkündür. Koronal ve enine görüntüsü, sanal eksen göz ve hayvanın kulak kepçesi birleştirme (Şekil 4) yönüne göre dönüştürücünün farklı eğim ile elde edilebilir. Şekil 4&#39;te açıklanan projeksiyonlarına göre transdüser eğerek, o ICA ve iki veya daha fazla şube içine daha fazla böler kaynaklanmaktadır Orta Serebral Arter (MCA) çözülmesi görüntüleri elde etmek mümkün olduğunu nihayet Surround kortikal lob (11 Şekil ve 12). En iyi görsel Şekil 4b&#39;de gösterdi İKA Şekil 4c ve için gösterdi sistemi eğerek MCA için elde edilmiştir. Kan akımının yönlü bilgiler Renkli Doppler edinme (Şekil 13) kullanılabilir sayesinde ise Doppler-akustik tabanlı görüntüleme, küçük dalları ortaya koymaktadır. MCA arter özelliği Darbeli Dalga ultrasonik tekniği (Şekil 14 ve 15) ile teyit edilir. Kırmızı kan hücreleri dolaşımdaki içine alan hemoglobinin fotoakustik sinyal tespit ve moleküler oksidatif durumu hakkında veri toplamak ve kan oksijen doygunluğu hesaplamak için analiz (16 ve 17 Şekil) olabilir. Hematik oksijen içeriği venöz kandan arteriyel kan ayrımcılığı teyit etmek için sonik verilere korelasyon olabilir. Oksipital foramen doğru dönüştürücüyü işaret ederek, vizyon kafası eksenel düzlemde (Şekil 9) üzerine yansıtılır ve bu görüntüleme düzlemi değişken eğim açılarına yerleşmiş olabilir. Bu durumda, görünüm beyin görüntüleme arka noktası ile akla olabilir<html> Çünkü büyük oksipital giriş yüksek penetrasyon derinliği,. Willis Circle, derin beyin karakteristik damar yapılandırma, lokalize ve tüm yukarıda belirtilen teknikler uygulanarak incelenebilir. Baziler arter (BA), beyincik ventral tarafında çalışan, sonunda ensafalona açar ve simetrik iki şube üzere iki kola ayrılır. Ventral beynin bu iki dal yaymak ve daha sonra bu nedenle bir halka yapısı (Willis Circle) oluşturarak, tekrar bir araya katılın. Bu bazal derin daire tüm orta ölçekli kan damarları, beyin için büyük bir kan temini esas efektörler olan Posterior, Orta ve Ön Serebral Arter (PCA, MCA ve ACA sırasıyla), gibi, ortaya hangi vasküler bodrum . Renkli Doppler modunda, orta ölçekli şube kimlik mümkündür ve Willis (Şekil 18) Circle giren (örneğin PCA gibi) kavisli damar segmentlerinin açıkça görüntülenmesini sağlar. Bu spektrum arteriyel ve venöz damarlarda elde edilen sinyal ayırt mümkün olan nt &quot;&gt; serebral parankimal doku da. spektral arsa (Şekil 20) vasküler karakterizasyonu göstermek için oksipital projeksiyon PA yöntemi (Şekil 19) ile kaydedildi. <img alt="Şekil 1," src="/files/ftp_upload/52162/52162fig1highres.jpg" /> Şekil 1: kafatası foramenlerin ve görüntü alımı için bakış ilgili noktası Konumu profili (a) ve görüntüleme dönüştürücü cihaz geçici forameni (mor ok) yan yana olmak üzere yerleştirilebilir sitelerinde sıçan kafası ve oksipital foramen üzerinde. profil (b) &#39;de (sarı ok). <img alt="Şekil 2," src="/files/ftp_upload/52162/52162fig2highres.jpg" /> Şekil 2: Temporal görüntü acquisitio Hayvan bertarafn. (A) görüntü elde etmek için tezgah üzerindeki hayvanın düzenleme: Kafa Tıraştan sonra, hayvan kafa zamansal tarafını ortaya çıkarmak için biraz bir tarafta eğik gövdeli bir yüzükoyun pozisyonda yerleştirilir. Tezgah muhtemelen satın alma sırasında hayvanın vücut sıcak tutmak için bir ısıtıcı cihazı ile donatılmış olabilir. Yapışkan yamalar hayati işareti izlenmesi için sensörler pençeleri tutturmak Bazı pamuk rulo, bu pozisyon elde etmek için kullanılabilir. (B) ultrason jeli tutarlı bir tabaka dönüştürücü görüntüleme sırasında yerleştirilmiş edileceği başın alanı kaplamaktadır. <img alt="Şekil 3," src="/files/ftp_upload/52162/52162fig3highres.jpg" width="550" /> Şekil 3: B-Mod görüntüleme için Toplama parametreleri. (A) Bir örnek ekran görüntüsü B beyin görüntüleme için kullanılan önemli kazanım parametrelerini raporlama paneli gösterenBiçem. (B) Daha da önemlisi, iletim frekansı düşük değerler (16 MHz) kuruldu ABD doku penetrasyonu artırmak için. <img alt="Şekil 4," src="/files/ftp_upload/52162/52162fig4highres.jpg" /> Şekil 4: Temporal foramenden Enine görüntü elde etme (a) göz ve dönüştürücü eğim ve görüntü elde etme uçağı değiştirmek için eğim hareketi (kırmızı ok) kulak kepçesi katılmadan ekseni sanal referans; göre hareket yönünün tersine (b). Referans kulak-göz ekseni ve dönüştürücü pozisyon değişken eğim, saygı c) Saat yönünde hareket kulak-göz ekseni ve dönüştürücü pozisyon değişken eğim başvurmak için. <img alt="Şekil 5," src="/files/ftp_upload/52162/52162fig5highres.jpg" /> Şekil 5: ABD Optimal odak derinliğiilgi alanı ararken ve PA görüntü alma. (sarı bir üçgen ile temsil edilen) görüntüleme odak derinliği optimal görüntüleme performansı elde etmek için, ABD / lazer kaynağından derinliği yaklaşık 10 mm ayarlanmalıdır. <img alt="Şekil 6," src="/files/ftp_upload/52162/52162fig6highres.jpg" width="300" /> Şekil 6: Renkli Doppler Modu görüntüleme için Toplama parametreleri. (A) Renkli Doppler modunda görüntü elde etme başlamadan önce, solunum kapı seçeneği fizyolojik solunum hareketleri tarafından oluşturulan artefakt önlemek için, açılabilir. (B) Renkli Doppler beyin görüntüleme için kullanılan önemli kazanım parametrelerini gösteren bir örnek teşkil ekran Mod. <img alt="Şekil 7," src="/files/ftp_upload/52162/52162fig7highres.jpg" width="300" /> Şekil 7: Toplama<html> Power Doppler görüntüleme modu parametreleri. Power Doppler Modu beyin görüntüleme için kullanılan önemli kazanım parametrelerini gösteren bir örnek ekran görüntüsü. <img alt="Şekil 8," src="/files/ftp_upload/52162/52162fig8highres.jpg" /> Şekil 8: foto akustik Modu görüntüleme için Toplama parametreleri. (A), panel foto akustik Modunda beyin görüntüleme için kullanılan önemli bir tedarik parametreleri e. Bir fotoakustik spektrumu (b) satın alınması, 5 nm&#39;lik bir dalga boyu aralığı ile 680 nm ila 970 nm arasında değişen bir lazer uyarma, göre (aşama olarak adlandırılır boyut). sırasıyla-de oksijenli ve oksijenli hemoglobin sinyallerinin ayrımcılık için, 750 nm ve 850 nm dalga tek foto akustik Modu için kullanılan (c) Toplama parametreleri. <html> fig9highres.jpg &quot;/&gt; Şekil 9:. Oksipital foramenden Enine görüntü elde etme hayvanın boynuna (sarı ok) (a) Dönüştürücü konumlandırma ve ortaya çıkan enine görüntüleme uçağı neredeyse bölümler caudo-rostral yönde kafa, dönüştürücü konumlandırma (b) arka görünümü ve görüntü elde etme düzlemi. <img alt="Şekil 10," src="/files/ftp_upload/52162/52162fig10highres.jpg" /> Şekil 10:. Anatomik referansların bireyleşme için zamansal foramen B-Mod edinimi Epidermis (a), kafatası (b) ve parankim (c) (örneğin fissür gibi, kolaylıkla ayırt, aynı zamanda diğer anatomik referanslar tespit edilebilir olabilir d) ventral derin beyin kısmı ve optik sistem (e) &#39;nin karakteristik bir şekle çevreleyen. Her zaman &quot;&gt;:&quot; tutmak-together.within-sayfa = fo &quot;ve_content <img alt="Şekil 11," src="/files/ftp_upload/52162/52162fig11highres.jpg" /> Şekil 11: vasküler referansların bireyleşme için zamansal foramenden Power Doppler Modu edinimi MCA zamansal beyin tarafında ICA yükselterek.. Bu görünümü elde etmek için, enine görüntü zamansal foramen üzerine dönüştürücüyü işaret ederek ve saat yönünün tersine çevirerek satın alınmıştır. <img alt="Şekil 12," src="/files/ftp_upload/52162/52162fig12highres.jpg" /> Şekil 12: vasküler referansların bireyleşme için zamansal foramenden Power Doppler Modu edinimi MCA zamansal beyin tarafında ICA yükselterek.. Bu görünümü elde etmek için, enine görüntü zamansal foramen üzerine dönüştürücüyü işaret ederek ve saat yönünde çevirerek satın alınmıştır. Şekil 13: vasküler referansların bireyleşme için zamansal foramenden Renkli Doppler Modu edinimi MCA zamansal beyin tarafında ICA yükselterek.. Kan akımının Yönlü bilgi dönüştürücü cihazına yönlendirilen ve ondan akı hareketler arasında ayrım, bir renk skalası çubuğu vasıtasıyla ifade edilir. <img alt="Şekil 14," src="/files/ftp_upload/52162/52162fig14highres.jpg" /> Şekil 14: vasküler referansların bireyleşme için zamansal foramenden Darbeli Dalga Modu edinimi varsayımsal arterler olarak belirlendi damar içinde dolaşan kanın arter özelliklerinin doğrulanması:. Darbeli Dalga Modu ilişkili olabilir akışı hızlarının değişimi hakkında bilgi sağlar kardiyak nabız etkisi (daha intearterlerde NSE damarlarında daha). <img alt="Şekil 15" src="/files/ftp_upload/52162/52162fig15highres.jpg" /> Şekil 15:. Akışı hızları kardiyak nabız etkisi ihmal edilebilir damarlar, kan damarlarının Darbeli Dalga Modu vasküler referanslar Belirlenmesi bireyleşme için zamansal foramenden Darbeli Dalga Modu edinimi. <img alt="Şekil 16" src="/files/ftp_upload/52162/52162fig16highres.jpg" /> Şekil 16: vasküler referansların bireyleşme için zamansal foramenden foto akustik Modu edinimi. B-Mode (solda) ve Tek-dalga foto akustik Modu (sağda) tarafından görüntülenmiştir zamansal beyin tarafında parankimal iç gemiler. Ölçek çubuğu renkleri bir seçili dalga boyunda yapılan bir lazer uyarma tarafından uyarılan foto akustik sinyal farklı yoğunluk değerlerini yansıtmaktadır. O dadamarları ve arterler bireyselleşmek için order, uyarma dalga boyları sırasıyla oksijeni alınmış ve oksijenli hemoglobin için foto akustik emisyon zirveleri elde etmek değerleri temsil, 750 ve 850 nm ayarlanabilir. <img alt="Şekil 17" src="/files/ftp_upload/52162/52162fig17highres.jpg" /> Şekil 17: oksijenli ve de-oksijenli hemoglobin ayrımcılık için zamansal foramenden foto akustik Modu edinimi. B-Mode (solda) ve Oxy-Hemo foto akustik Modu (sağda) tarafından görüntülenmiştir zamansal beyin tarafında İç gemiler. Ölçek çubuğu renkleri kan hemoglobin oksijen doygunluğu farklı yüzde değerlerini yansıtır. <img alt="Şekil 18" src="/files/ftp_upload/52162/52162fig18highres.jpg" /> Şekil 18: vasküler referansların bireyleşme için oksipital foramen yoluyla Renkli Doppler Modu edinimi.Ventral beyin tarafında bulunan Willis poligonu, bodrum yapısı oluşturma kavisli vasküler segmentler. <img alt="Şekil 19" src="/files/ftp_upload/52162/52162fig19highres.jpg" /> Şekil 19: vasküler referansların bireyleşme için oksipital foramen yoluyla foto akustik ve B-Mod edinimi. B-modda Nell&#39;immagine si Possono evidenziare le strutture anatomiche individuabili con la proiezione occipitale&#39;in e nella corrispondente acquisizione con modalità fotoacustica con rilevamento spettrale tra 670 nm 980 nm (con adım di 5 nm). <img alt="Şekil 20" src="/files/ftp_upload/52162/52162fig20highres.jpg" /> Şekil 20: vasküler referansların bireyleşme için oksipital foramen yoluyla foto akustik ve B-Mod edinimi. Questa hayal viene rappresentato lo Spettro corrispondeNTE alle tre ROI tracciate bir livello del parenşim cerebellare; in particolare sono tracciate bir livello di tre strutture vascolari la cui Tipologia si differenzia bir livello dell&#39;andamento spettrale (ROI fuxia e celeste corrispondono bir strutture vascolari venose; ROI gialla corrisponde reklam una struttura vascolare arteriosa).

Watch this Scientific Journal Video about Non-invasive Parenchymal, Vascular and Metabolic High-frequency Ultrasound and Photoacoustic Rat Deep Brain Imaging at JoVE.com

Non-invasive Parenchymal, Vascular and Metabolic High-frequency Ultrasound and Photoacoustic Rat Deep Brain Imaging

The present work describes a new protocol to perform non-invasive high-frequency ultrasound and photoacoustic based imaging on rat brain, to efficiently visualize deep subcortical regions and their vascular patterns by directing signals on skull foramina naturally present on animal cranium.

Non-invaziv parankim, Vasküler ve Metabolik Yüksek frekanslı ultrason ve foto akustik Sıçan Derin Beyin Görüntüleme

Photoacoustics and high frequency ultrasound stands out as powerful tools for neurobiological applications enabling high-resolution imaging on the central ...

non-invasive-parenchymal-vascular-metabolic-high-frequency-ultrasound

Research

JoVE Journal

Neuroscience

12.0K Görüntüleme.  University of Turin. The present work describes a new protocol to perform non-invasive high-frequency ultrasound and photoacoustic based imaging on rat brain, to efficiently visualize deep subcortical regions and their vascular patterns by directing signals on skull foramina naturally present on animal cranium.

Video: Non-invasive Parenchymal, Vascular and Metabolic High-frequency Ultrasound and Photoacoustic Rat Deep Brain Imaging

Immunohistochemical Analysis in the Rat Central Nervous System and Peripheral Lymph Node Tissue Sections

Immunohistochemistry (IHC) provides highly specific, reliable and attractive protein visualization. Correct performance and interpretation of an IHC-based multicolor labeling is challenging, especially when utilized for assessing interrelations between target proteins in the tissue with a high fat content such as the central nervous system (CNS).
Our protocol represents a refinement of the standard immunolabeling technique particularly adjusted for detection of both structural and soluble proteins in the rat CNS and peripheral lymph nodes (LN) affected by neuroinflammation. Nonetheless, with or without further modifications, our protocol could likely be used for detection of other related protein targets, even in other organs and species than here presented.

We here present an optimized, detailed protocol for double immunostaining in formalin-fixed, paraffin-embedded rat central nervous system (CNS) and peripheral lymph node (LN) tissue sections.

Sıçan Santral Sinir Sistemi immunohistokimyasal Analizi ve Çevresel lenf nodu Doku Bölümler

Immunohistochemistry (IHC) provides highly specific, reliable and attractive protein visualization. Correct performance and interpretation of an IHC-based ...

Nörobilim

Deep Brain Stimulation with Simultaneous fMRI in Rodents

In order to visualize the global and downstream neuronal responses to deep brain stimulation (DBS) at various targets, we have developed a protocol for using blood oxygen level dependent (BOLD) functional magnetic resonance imaging (fMRI) to image rodents with simultaneous DBS. DBS fMRI presents a number of technical challenges, including accuracy of electrode implantation, MR artifacts created by the electrode, choice of anesthesia and paralytic to minimize any neuronal effects while simultaneously eliminating animal motion, and maintenance of physiological parameters, deviation from which can confound the BOLD signal.&#160;Our laboratory has developed a set of procedures that are capable of overcoming most of these possible issues. For electrical stimulation, a homemade tungsten bipolar microelectrode is used, inserted stereotactically at the stimulation site in the anesthetized subject. In preparation for imaging, rodents are fixed on a plastic headpiece and transferred to the magnet bore. For sedation and paralysis during scanning, a cocktail of dexmedetomidine and pancuronium is continuously infused, along with a minimal dose of isoflurane; this preparation minimizes the BOLD ceiling effect of volatile anesthetics. In this example experiment, stimulation of the subthalamic nucleus (STN) produces BOLD responses which are observed primarily in ipsilateral cortical regions, centered in motor cortex. Simultaneous DBS and fMRI allows the unambiguous modulation of neural circuits dependent on stimulation location and stimulation parameters, and permits observation of neuronal modulations free of regional bias. This technique may be used to explore the downstream effects of modulating neural circuitry at nearly any brain region, with implications for both experimental and clinical DBS.

This protocol describes a standard method for simultaneous functional magnetic resonance imaging and deep brain stimulation in the rodent. The combined use of these experimental tools allows for the exploration of global downstream activity in response to electrical stimulation at virtually any brain target.

Kemirgenler Eşzamanlı fMRI ile derin beyin stimülasyonu

In order to visualize the global and downstream neuronal responses to deep brain stimulation (DBS) at various targets, we have developed a protocol for ...

Analysis of Gene Expression Changes in the Rat Hippocampus After Deep Brain Stimulation of the Anterior Thalamic Nucleus

Deep brain stimulation (DBS) surgery, targeting various regions of the brain such as the basal ganglia, thalamus, and subthalamic regions, is an effective treatment for several movement disorders that have failed to respond to medication. Recent progress in the field of DBS surgery has begun to extend the application of this surgical technique to other conditions as diverse as morbid obesity, depression and obsessive compulsive disorder. Despite these expanding indications, little is known about the underlying physiological mechanisms that facilitate the beneficial effects of DBS surgery. One approach to this question is to perform gene expression analysis in neurons that receive the electrical stimulation. Previous studies have shown that neurogenesis in the rat dentate gyrus is elicited in DBS targeting of the anterior nucleus of the thalamus1. DBS surgery targeting the ATN is used widely for treatment refractory epilepsy. It is thus of much interest for us to explore the transcriptional changes induced by electrically stimulating the ATN. In this manuscript, we describe our methodologies for stereotactically-guided DBS surgery targeting the ATN in adult male Wistar rats. We also discuss the subsequent steps for tissue dissection, RNA isolation, cDNA preparation and quantitative RT-PCR for measuring gene expression changes. This method could be applied and modified for stimulating the basal ganglia and other regions of the brain commonly clinically targeted. The gene expression study described here assumes a candidate target gene approach for discovering molecular players that could be directing the mechanism for DBS.

The mechanism underlying the therapeutic effects of Deep Brain Stimulation (DBS) surgery needs investigation. The methods presented in this manuscript describe an experimental approach to examine the cellular events triggered by DBS by analyzing the gene expression profile of candidate genes that can facilitate neurogenesis post DBS surgery.

Ön Talamusun Çekirdek Derin Beyin Stimülasyon sonra Sıçan Hippocampus Gen İfade Değişim Analizi

Deep brain stimulation (DBS) surgery, targeting various regions of the brain such as the basal ganglia, thalamus, and subthalamic regions, is an effective ...

Non-invasive Assessment of Changes in Corticomotoneuronal Transmission in Humans

The corticospinal pathway is the major pathway connecting the brain with the muscles and is therefore highly relevant for movement control and motor learning. There exists a number of noninvasive electrophysiological methods investigating the excitability and plasticity of this pathway. However, most methods are based on quantification of compound potentials and neglect that the corticospinal pathway consists of many different connections that are more or less direct. Here, we present a method that allows testing excitability of different fractions of the corticospinal transmission. This so called H-reflex conditioning technique allows one to assess excitability of the fastest (monosynaptic) and also polysynaptic corticospinal pathways. Furthermore, by using two different stimulation sites, the motor cortex and the cervicomedullary junction, it allows not only differentiation between cortical and spinal effects but also assessment of transmission at the corticomotoneural synapse. In this manuscript, we describe how this method can be used to assess corticomotoneural transmission after low-frequency repetitive transcranial magnetic stimulation, a method that was previously shown to reduce excitability of cortical cells. Here we demonstrate that not only cortical cells are affected by this repetitive stimulation but also transmission at the corticomotoneuronal synapse at the spinal level. This finding is important for the understanding of basic mechanisms and sites of neuroplasticity. Besides investigation of basic mechanisms, the H-reflex conditioning technique may be applied to test changes in corticospinal transmission following behavioral (e.g., training) or therapeutic interventions, pathology or aging and therefore allows a better understanding of neural processes that underlie movement control and motor learning.

The aim of the present study was to assess changes in transmission at the corticomotoneuronal synapses in humans after repetitive transcranial magnetic stimulation. For this purpose, an electrophysiological method is introduced that allows assessment of pathway specific corticospinal transmission, i.e. differentiation of fast, direct corticospinal pathways from polysynaptic connections.

İnsanlarda Corticomotoneuronal İletimde Değişikliklerin İnvaziv Olmayan Değerlendirilmesi

The corticospinal pathway is the major pathway connecting the brain with the muscles and is therefore highly relevant for movement control and motor ...

Isolation and Cannulation of Cerebral Parenchymal Arterioles

Intracerebral parenchymal arterioles (PAs), which include parenchymal arterioles, penetrating arterioles and pre-capillary arterioles, are high resistance blood vessels branching out from pial arteries and arterioles and diving into the brain parenchyma. Individual PA perfuse a discrete cylindrical territory of the parenchyma and the neurons contained within. These arterioles are a central player in the regulation of cerebral blood flow both globally (cerebrovascular autoregulation) and locally (functional hyperemia). PAs are part of the neurovascular unit, a structure that matches regional blood flow to metabolic activity within the brain and also includes neurons, interneurons, and astrocytes. Perfusion through PAs is directly linked to the activity of neurons in that particular territory and increases in neuronal metabolism lead to an augmentation in local perfusion caused by dilation of the feed PA. Regulation of PAs differs from that of better-characterized pial arteries. Pressure-induced vasoconstriction is greater in PAs and vasodilatory mechanisms vary. In addition, PAs do not receive extrinsic innervation from perivascular nerves &#8212; innervation is intrinsic and indirect in nature through contact with astrocytic endfeet. Thus, data regarding contractile regulation accumulated by studies using pial arteries does not directly translate to understanding PA function. Further, it remains undetermined how pathological states, such as hypertension and diabetes, affect PA structure and reactivity. This knowledge gap is in part a consequence of the technical difficulties pertaining to PA isolation and cannulation. In this manuscript we present a protocol for isolation and cannulation of rodent PAs. Further, we show examples of experiments that can be performed with these arterioles, including agonist-induced constriction and myogenic reactivity. Although the focus of this manuscript is on PA cannulation and pressure myography, isolated PAs can also be used for biochemical, biophysical, molecular, and imaging studies.

This manuscript describes a simple and reproducible protocol for isolation of intracerebral arterioles (a group of blood vessels encompassing parenchymal arterioles, penetrating arterioles and pre-capillary arterioles) from mice, to be used in pressure myography, immunofluorescence, biochemistry, and molecular studies.

İzolasyon ve Serebral Parankimal arteriollerin kanülasyonu

Intracerebral parenchymal arterioles (PAs), which include parenchymal arterioles, penetrating arterioles and pre-capillary arterioles, are high resistance ...

Non-Invasive Modulation and Robotic Mapping of Motor Cortex in the Developing Brain

Mapping the motor cortex with transcranial magnetic stimulation (TMS) has potential to interrogate motor cortex physiology and plasticity but carries unique challenges in children. Similarly, transcranial direct current stimulation (tDCS) can improve motor learning in adults but has only recently been applied to children. The use of tDCS and emerging techniques like high&#8211;definition tDCS (HD-tDCS) require special methodological considerations in the developing brain. Robotic TMS motor mapping may confer unique advantages for mapping, particularly in the developing brain. Here, we aim to provide a practical, standardized approach for two integrated methods capable of simultaneously exploring motor cortex modulation and motor maps in children. First, we describe a protocol for robotic TMS motor mapping. Individualized, MRI-navigated 12x12 grids centered on the motor cortex guide a robot to administer single-pulse TMS. Mean motor evoked potential (MEP) amplitudes per grid point are used to generate 3D motor maps of individual hand muscles with outcomes including map area, volume, and center of gravity. Tools to measure safety and tolerability of both methods are also included. Second, we describe the application of both tDCS and HD-tDCS to modulate the motor cortex and motor learning. An experimental training paradigm and sample results are described. These methods will advance the application of non-invasive brain stimulation in children.

We demonstrate protocols for the modulation (tDCS, HD-tDCS) and mapping (robotic TMS) of the motor cortex in children.

Gelişmekte olan beyin motor Cortex non-Invaziv modülasyon ve robotik haritalama

Mapping the motor cortex with transcranial magnetic stimulation (TMS) has potential to interrogate motor cortex physiology and plasticity but carries ...

Targeted Neuronal Injury for the Non-Invasive Disconnection of Brain Circuitry

Surgical intervention can be quite effective for treating certain types of medically intractable neurological diseases. This approach is particularly useful for disorders in which identifiable neuronal circuitry plays a key role, such as epilepsy and movement disorders. Currently available surgical modalities, while effective, generally involve an invasive surgical procedure, which can result in surgical injury to non-target tissues. Consequently, it would be of value to expand the range of surgical approaches to include a technique that is both non-invasive and neurotoxic.
Here, a method is presented for producing focal, neuronal lesions in the brain in a non-invasive manner. This approach utilizes low-intensity focused ultrasound together with intravenous microbubbles to transiently and focally open the Blood Brain Barrier (BBB). The period of transient BBB opening is then exploited to focally deliver a systemically administered neurotoxin to a targeted brain area. The neurotoxin quinolinic acid (QA) is normally BBB-impermeable, and is well-tolerated when administered intraperitoneally or intravenously. However, when QA gains direct access to brain tissue, it is toxic to the neurons. This method has been used in rats and mice to target specific brain regions. Immediately after MRgFUS, successful opening of the BBB is confirmed using contrast enhanced T1-weighted imaging. After the procedure, T2 imaging shows injury restricted to the targeted area of the brain and the loss of neurons in the targeted area can be confirmed post-mortem utilizing histological techniques. Notably, animals injected with saline rather than QA do demonstrate opening of the BBB, but dot not exhibit injury or neuronal loss. This method, termed Precise Intracerebral Non-invasive Guided surgery (PING) could provide a non-invasive approach for treating neurological disorders associated with disturbances in neural circuitry.

The goal of the protocol is to provide a method for producing non-invasive neuronal lesions in the brain. The method utilizes Magnetic Resonance-guided Focused Ultrasound (MRgFUS) to open the Blood Brain Barrier in a transient and focal manner, in order to deliver a circulating neurotoxin to the brain parenchyma.

Beyin Devrelerinin İnvaziv Olmayan Bağlantısının Hedefli Nöronal Yaralanma

Surgical intervention can be quite effective for treating certain types of medically intractable neurological diseases. This approach is particularly ...

Analysis of Cerebral Vasospasm in a Murine Model of Subarachnoid Hemorrhage with High Frequency Transcranial Duplex Ultrasound

Cerebral vasospasm that occurs in the weeks after subarachnoid hemorrhage, a type of hemorrhagic stroke, contributes to delayed cerebral ischemia. A problem encountered in experimental studies using murine models of SAH is that methods for in vivo monitoring of cerebral vasospasm in mice are lacking. Here, we demonstrate the application of high frequency ultrasound to perform transcranial Duplex sonography examinations on mice. Using the method, the internal carotid arteries (ICA) could be identified. The blood flow velocities in the intracranial ICAs were accelerated significantly after induction of SAH, while blood flow velocities in the extracranial ICAs remained low, indicating cerebral vasospasm. In conclusion, the method demonstrated here allows functional, noninvasive in vivo monitoring of cerebral vasospasm in a murine SAH model.

The aim of this manuscript is to present a sonography-based method that allows in vivo imaging of blood flow in cerebral arteries in mice. We demonstrate its application to determine changes in blood flow velocities associated with vasospasm in murine models of subarachnoid hemorrhage (SAH).

Yüksek Frekanslı Transkraniyal Dubleks Ultrason ile Subaraknoid Kanamanın Murine Modelinde Serebral Vazospazm Analizi

Cerebral vasospasm that occurs in the weeks after subarachnoid hemorrhage, a type of hemorrhagic stroke, contributes to delayed cerebral ischemia. A ...

Whole-Brain 3D Activation and Functional Connectivity Mapping in Mice using Transcranial Functional Ultrasound Imaging

Functional ultrasound (fUS) imaging is a novel brain imaging modality that relies on the high-sensitivity measure of the cerebral blood volume achieved by ultrafast doppler angiography. As brain perfusion is strongly linked to local neuronal activity, this technique allows the whole-brain 3D mapping of task-induced regional activation as well as resting-state functional connectivity, non-invasively, with unmatched spatio-temporal resolution and operational simplicity. In comparison with fMRI (functional magnetic resonance imaging), a main advantage of fUS imaging consists in enabling a complete compatibility with awake and behaving animal experiments. Moreover, fMRI brain mapping in mice, the most used preclinical model in Neuroscience, remains technically challenging due to the small size of the brain and the difficulty to maintain stable physiological conditions. Here we present a simple, reliable and robust protocol for whole-brain fUS imaging in anesthetized and awake mice using an off-the-shelf commercial fUS system with a motorized linear transducer, yielding significant cortical activation following sensory stimulation as well as reproducible 3D functional connectivity pattern for network identification.

This protocol describes the quantification of volumetric cerebral hemodynamic variations in the mouse brain using functional ultrasound (fUS). Procedures for 3D functional activation map following sensory stimulation as well as resting-state functional connectivity are provided as illustrative examples, in anesthetized and awake mice.

Transkraniyal Fonksiyonel Ultrason Görüntüleme Kullanan Farelerde Tüm Beyin 3D Aktivasyon ve Fonksiyonel Bağlantı Haritalaması

Functional ultrasound (fUS) imaging is a novel brain imaging modality that relies on the high-sensitivity measure of the cerebral blood volume achieved by ...

Stereotaxic Viral Injection and Gradient-Index Lens Implantation for Deep Brain In Vivo Calcium Imaging

A miniature fluorescence microscope (miniscope) is a potent tool for in vivo calcium imaging from freely behaving animals. It offers several advantages over conventional multi-photon calcium imaging systems: (1) compact; (2) light-weighted; (3) affordable; and (4) allows recording from freely behaving animals. This protocol describes brain surgeries for deep brain in vivo calcium imaging using a custom-developed miniscope recording system. The preparation procedure consists of three steps, including (1) stereotaxically injecting the virus at the desired brain region of a mouse brain to label a specific subgroup of neurons with genetically encoded calcium sensor; (2) implantation of gradient-index (GRIN) lens that can relay calcium image from deep brain region to the miniscope system; and (3) affixing the miniscope holder over the mouse skull where miniscope can be attached later. To perform in vivo calcium imaging, the miniscope is fastened onto the holder, and neuronal calcium images are collected along with simultaneous behavior recordings. The present surgery protocol is compatible with any commercial or custom-built single-photon and two-photon imaging systems for deep brain in vivo calcium imaging.

Stereotaxic Viral Injection and Gradient-Index Lens Implantation for Deep Brain In Vivo Calcium Imaging

Miniscope in vivo calcium imaging is a powerful technique to study neuronal dynamics and microcircuits in freely behaving mice. This protocol describes performing brain surgeries to achieve good in vivo calcium imaging using a miniscope.

Derin Beyin In Vivo Kalsiyum Görüntüleme için Stereotaksik Viral Enjeksiyon ve Degrade İndeks Lens İmplantasyonu

A miniature fluorescence microscope (miniscope) is a potent tool for in vivo calcium imaging from freely behaving animals. It offers several advantages ...