Protokolümüz epileptik nöbettedavisinde yeni bir çözüm önerebilir çok yeni bir cihaz kullanarak doğal olarak meydana gelen inhibitör nörotransmitter GABA yerel yönetim yararlanır. Mikroaritmik iyon pompası, ilaçları tam olarak ne zaman ve nerede teslim ettiğimiz ivedilikle kontrol etmemizi sağlıyor. Hassas dişli elektroforetik doğum diğer nörolojik hastalıkları hedef modifiye edilebilir.
Bu ilaç dağıtım tekniğinin bir diğer faydası da ilaç dağıtım çıkışında çok ihmal edilebilir bir basınç artışı olmasıdır çünkü aslında teslim edilen bir sıvı yoktur. Aksine, sadece ilaç moleküllerinin kendileri. Probların yakın yerelleştirilmesi en büyük sorun teşkil edeceği için, stereotaksik çerçevede kukla probları ile hizalama açıları ve konumlandırma test etmek için çok görünür.
Stereotaksik bir çerçeve içinde bir anestezili farenin başını sabitleme ve planlanan kesi yerinde lokal bir analjezik subkutan enjekte etmek için 30 gauge iğne kullanarak başlayın. Beş dakika sonra, kafatasında bir orta hat kesi yapmak için bir neşter kullanın. Ve nazikçe cilt geri çekmek için ince forceps kullanın.
Bulldog Serofine kelepçeler ile cilt kelepçe. Ve fasyanın maruz kalan kafatası yüzeyini temizleyin. Ince, yuvarlak 0.4 milimetre matkap ucu ile bir diş matkap kullanarak, dura görünür kadar beyincik üzerinde kafatasında bir delik matkap.
Deliğe zemin vida yerleştirin ve beyincik üstüne ulaşana kadar vida açmak için hassas bir tornavida kullanın. Stereotaksik çerçeveyi kullanarak, istenilen beyin bölgesi için stereotaksik koordinatları ölçün ve ince, iyi cilalı şeffaf kemik zarı kalana kadar kafatasının yaklaşık bir ila iki milimetre çapındaki bir alanını, hedef bölge hakkında inceltmek için matkap setini hızlı bir hızda kullanın. Daha sonra, durayı çıkarmak ve çıkan deliğe bir damla tuzlu su eklemek için özel yapım bir kancalı uçlu iğne kullanın.
Çok kanallı silikon probu yerleştirmek için, probu manyetik tutucuya bağlı stereotaksik kola yerleştirin ve kolu stereotaksik çerçevenin yanına yerleştirin. Stereotaksik kolları, diğer iki implantın konumlandırılması için yeterli alan bırakmak için 20 derecelik hafif bir anterior-posterior açıya ayarlayın. Ve sondayı baş sahnesine ve yer vidasına bağlayın.
Hedeflenen dorsoventral konuma ulaşılAna kadar korteksin üstünden çok kanallı silikon probu hareket ederken yavaş yavaş hipokampus içine silikon prob düşürmek ve elektrikli nöronal sinyalleri kaydetmek için kayıt yazılımı başlatmak için mikron hassas stereotaksik kolu kullanın. Daha sonra, aynı anda bilgisayar ekranında penetrasyon sırasında korteks ve hipokampus katmanlarından yerel alan potansiyel sinyali kaydetmek ve hedef bölgenin bir işareti olarak kaydedilen yerel alan potansiyelinde hipokampal oluşumunun piramidal tabakasında dalgalanma aktivitesini kullanın. Mikroakışkan iyon pompasının doldurulması için tüpleri pompanın girişine bağlayın ve probu 0,05 molar GABA çözeltisi ile doldurun.
Tüpleri çıkarın ve girişi parafin film sarma ile kapatın ve mikroakışkan iyon pompasının tutucuya güvenli bir şekilde bağlı olduğundan emin olun. Elektrik kablolarını kaynak ölçüm ünitesine bağlamadan önce tutucuyu mikromanipülatör koluna monte ederken dikkatli olun. 20 derecelik medio-lateral açıda stereotaksik kol ile, pompa kortikal yüzeyden negatif 1200 mikrometre dorsoventral koordinat ulaşana kadar, pompa viraj izin vermeden, pompa mümkün olduğunca yakın eksenel hareketleri ile pompa yavaş yavaş düşürün.
Nöbet indüksiyonuna hazırlanırken, 10 mikrolitrelik şırınganın metal iğne merkezini çıkarın ve şırınga ucuna borosilicate mikropipeti sabitle. Göbeği mikropipet ucunun üzerine yerleştirin ve şırıngayı 20 derecelik yanal-medial açıyla yerleştirin. Şırınga içine yapay beyin omurilik sıvısı 500 ila 1000 nanolitre yüklemek için otomatik bir mikroenjeksiyon pompası kullanın ve dorsoventral koordinat konumuna cam micropipeette düşürmek.
Çözeltinin 250 nanolitresini beyne enjekte edin ve yazılımdaki kaydı başlatın. Sonra, ekranı izlemek ve gaba çözümü sunmak için 30 döngüleri için 100 saniye ve bir saniye kapalı kaynak ve hedef arasında bir volt uygulamadan önce görünmesini ilk interictal başak bekleyin. İmplantların kesin lokalizasyonu hipokampal yerel alan potansiyellerinin kaydedilmesinde yardımcı olur, küçük hipokampal nöbetler indükleyen, ve nöbet başlangıcında GABA teslim.
Ayrıca, implantların lokalizasyonu her deneyden sonra post hoc histolojisi ile doğrulanabilir. Burada, nöbet benzeri olayların yeni nöronal sonda ile GABA teslimi ile durdurulabilir bir örnek, mikroakışkan sonda içeren gösterilir. Dört aminopiridin daha büyük bir alana veya korteksin üst üzerine enjekte edildiğinde, epileptik nöbetler jeneralize oldu, bu yüzden teslim GABA epileptik nöbetlerin ölçüde değiştirmek mümkün değildi.
Özellikle, sodyum iyonlarının teslim dört aminopiridin kaynaklı aktivite üzerinde önemli bir etkisi yoktu. Yani bu protokol, birden fazla kırılgan sonda yerleştirmeyi içeren herhangi bir stereotaksik cerrahi için yararlı olabilir. Mikroakışkan iyon pompası yardımıyla, yüklü moleküllerdiğer türler sadece epilepsi tedavisinde tanıtıldı olabilir, ama diğer nörolojik hastalıklar.
Doku iç içe elektroforetik iletimi, türlerin herhangi bir yumuşak dokuya tesliminde genel olarak yeni bir yaklaşım sunar. Bir toksin olduğundan ve epilepsi neden olduğu için, 4AP uygularken özel dikkat edin.
