Burada, doğanın farklı düzeylerinde üç yere yapılan bir ziyaretin ardından biyofiziksel ve psikolojik stres düzeyleri üzerindeki etkilerini incelemek için kullanılan bir protokol salıyoruz. Daha yüksek doğallık seviyelerine sahip bir sitenin katılımcıların stres düzeylerini düşürmelerine yardımcı olmada daha etkili olup olmayacağını öğrenmek istiyoruz. Kendi kendine rapor anketi kullanmanın yanı sıra, bu tekniği kullanarak ana avantajı katılımcılardan tükürük örnekleri toplanan kortizol ve amilaz düzeylerini analiz bize daha doğru bir okuma ve vücudumuzun aslında rekreasyon sitelerine ziyaret ettikten sonra nasıl tepki daha iyi bir anlayış verebilir olmasıdır.
Prosedürü gösteren Dr.Hocevar, Indiana Üniversitesi'nden profesör olacaktır. Konuya kendinizi tanıtarak başlayın. Çalışmanın gönüllü niteliğini, amacını ve prosedürlerini açıklayan bir onay formu sağlayın.
Deneğe ileride kimlik tespiti için kırmızı bir kol bandı verin. Tükürük örnekleri ile stres düzeylerinin fizyolojik ve psikolojik ölçülerini, eğlence deneyiminden hemen önce ve deneyimin tamamlanmasından hemen sonra elde edin. Pasif salya yöntemi kullanarak bir ila iki mililitre tükürük örneği toplayın.
Bir mililitre toplanana kadar tükürük ağızlarında havuz izin vermek için konular talimat, sonra iki inç saman aşağı salya ve kriyo şişe içine. Veri toplama nın zamanlamasını belirtmek için atanmış üç basamaklı kimlik numarası ve harfiçeren örnekleri etiketleyin. Sonra, geçici olarak en fazla iki saat kuru buz dolu bir steroid köpük kutusunda örnek dondurma.
İşaretli numuneleri bir laboratuvara taşıyın ve analiz edilene kadar eksi 80 derecede saklayın. Son olarak, tükürük örneklerinde alfa amilaz ölçmek için ayarlanmış bir sıvı amilaz reaktifkullanın. Daha sonra, 405 nanometrede optik yoğunluğu okuyabilen ve sıcaklık 37 santigrat dereceye kadar kontrol edilen çok modlu bir okuyucu kullanın.
İlk olarak, tükürük örneklerinde kortizol ölçmek için bir kortizol enzimamino asit kiti edinin, optik yoğunluk okumak için bir spektrofotometre, veya OD, 450 nanometre yanı sıra dört parametre lojistik eğri montaj gerçekleştirmek için plaka okuyucu Dan OD kayıtları kullanma yeteneğine sahip yazılım. Tüm reaktiflerin en az 30 dakika boyunca 20 ila 25 santigrat dereceye kadar dengelemesine izin verin. Deiyonize su kullanarak kortizol titreştirici tampon1-5 seyreltin, sonra deiyonize su kullanarak yıkama tampon 1-20 seyreltin.
Daha sonra, analizden önce buzdaki numuneleri eritin. Daha sonra, kortizol tsay tampon ve hazırlık iki saat içinde kullanmak ile 1 ila 10 örnekleri seyreltin. Standartları hazırlamak için, etiket cam test tüpleri 1-yedi.
Daha sonra, 225 mikrolitre lik bir gazar tamponu bir numaralı tüpe, 125 mikrolitre de tüplere iki ila yedi arasında tampon. Sonra, bir numaralı tüpe kortizol stok çözeltisinin 25 mikrolitresini ekleyin ve girdap. Son olarak, bir numaralı tampondan 125 mikrolitre tampon çıkarın ve tüp sayısı iki, sonra tekrar girdap ekleyin.
Sonuçlar, doğal ayarı olan A sitesini ziyaret ettikten sonra önemli düzeyde tükürük kortizolünün azaldığını göstermiştir. B ve C.Further bölgesinde kortizol düzeylerinde önemli bir değişiklik gözlenmedi, denekler inkiştirilmadıktan sonra alfa amilaz düzeyleri arttı.Üç yeri ziyaret ettikten ve kendi kendine rapor anketleri kullandıktan sonra talep ve endişe faktörlerinde önemli düşüşler gözlendi. Üç lokasyondan herhangi birinde faktör geriliminde önemli bir değişiklik gözlenmedi ve faktör neşesi için A ve B sitesinde önemli artışlar rapor edildi.
Tipik olarak, stres azaltma üzerine yapılan araştırmaların çoğu kendi kendine rapor anketlerine dayanıyordu. Bu çalışmada, farklı doğallık seviyelerine sahip üç siteye ziyaret edildikten sonra vücudumuzun gerçekte nasıl tepki verebildiğini analiz etmek için katılımcının tükürük örneklerini topladık. Bu görselleştirmede, hem laboratuvar tekniklerini hem de doldurulmuş veri toplamanın bir örneğini öne çıkarabiliyoruz.
Bu teknik araştırmacı farklı ortamlara vücudumuzun tepkisini yakalamak için izin verir. Doğal çevrenin insan sağlığı üzerinde olumlu etkileri olabileceği hipotezimizi doğrular. Gelecekteki araştırmalar, gerçek deneysel tasarım ile farklı doğal ortamlar veya farklı açık hava etkinlikleri arasında stres düzeyi biyofiziksel ölçümleruygulamak için önerilmektedir.