Coloração de Gram de bactérias de fontes ambientais

Overview

Fonte: Laboratórios do Dr. Ian Pepper e Dr. Charles Gerba - Universidade do Arizona
Autora de Demonstração: Luisa Ikner

O espectro de pesquisas em microbiologia ambiental é amplo em escopo e potencial de aplicação. Se o trabalho é de bancada com isolados bacterianos conhecidos, ou no campo coletando amostras de solo ou água contendo isolados bacterianos desconhecidos, a capacidade de discernir rapidamente e visualmente populações culturais de interesse permanece de grande importação para microbiologistas ambientais ainda hoje com a abundância de técnicas moleculares disponíveis para uso. Este vídeo demonstrará uma dessas técnicas, conhecida como mancha gram.

Procedure

1. Coleta de Amostras

Coletar amostras de solo e transportar para o laboratório para análise microbiana.
No laboratório, pese uma amostra de 10 g usando um equilíbrio analítico.
Diluir a amostra 1:10 em 95 mL de soro fisiológico tamponado com fosfato (10 partes de solo equivale a 5 partes de líquido aquoso) e vórtice para misturar(Figura 2, Passo 1).
Realizar diluições subsequentes de 1:10 até pelo menos 10^-5 g de solo por mL, e diluições se...

Application and Summary

A mancha de Gram é usada nos muitos subágros da microbiologia ambiental e clínica. Cientistas de qualidade da água podem usar a mancha de Gram como uma ferramenta confirmatória para a detecção de bactérias fecais em amostras de água. Isolados bacterianos de solos são manchados de Gram para caracterizar ainda mais as comunidades de solos culturais. Para microbiologistas ambientais, a mancha de gram auxilia na categorização das populações bacterianas de acordo com a estrutura da parede celular. Isso, por sua ...