Kultivierung und Auflisten von Bakterien aus Bodenproben

Quelle: Labors von Dr. Ian Pfeffer und Dr. Charles Gerba - Arizona University
Demonstrierende Autoren: Bradley Schmitz und Luisa Ikner

Oberböden sind eine heterogene Mischung von anorganischen und organischen Partikeln, die sekundäre Form Aggregate kombinieren. Innerhalb und zwischen den Aggregaten sind Hohlräume oder Poren, die visuell beide enthalten Luft und Wasser. Diese Bedingungen stellen ein ideales Ökosystem für Bakterien, so dass alle Böden große Populationen von Bakterien, in der Regel mehr als 1 Million pro Gramm Boden enthalten.

Bakterien sind die einfachsten von Mikroorganismen, bekannt als Prokaryoten. Innerhalb dieser prokaryotische Gruppe sind die faserigen Mikroben Aktinomyceten genannt. Aktinomyceten sind tatsächlich Bakterien, aber sie gelten häufig als eine einzigartige Gruppe innerhalb der Klassifikation von Bakterien wegen ihrer faserigen Struktur besteht aus mehrere Zellen aneinandergereiht, Form Hyphen. Dieses Experiment verwendet Glycerin Fall Medien, die auswählen für gelangte Kolonien, während Verdünnung und Beschichtung. Aktinomyceten sind in der Regel etwa 10 % der gesamten Bakterienpopulation. Bakterien und Actinomyceten sind in jeder Umgebung auf der Erde gefunden, aber die Fülle und Vielfalt dieser Mikroben im Boden ist beispiellos. Diese Mikroben sind auch Voraussetzung für menschliches Leben und beeinflussen, was die Leute Essen, trinken, atmen oder berühren. Darüber hinaus gibt es Bakterienarten, die Menschen infizieren und Krankheiten verursachen können, und gibt es Bakterien, die Naturprodukte, die Heilung von Menschen erzeugen können. Aktinomyceten sind besonders wichtig für die Herstellung von Antibiotika wie Streptomycin. Bakterien sind entscheidend für die Nährstoff Radfahren, Pflanzenwachstum und Abbau der organischen Verunreinigungen.

Bakterien sind sehr unterschiedlich in Bezug auf die Anzahl der Arten, die teilweise im Boden gefunden werden können, da sie physiologisch und metabolisch vielfältig sind. Bakterien können heterotrophen, was bedeutet, dass sie organische Verbindungen wie Glucose, für Nahrung und Energie, nutzen oder autotroph, was bedeutet, dass sie anorganische Verbindungen, wie z. B. elementarem Schwefel, nach Nahrungsmitteln und Energie zu nutzen. Sie können auch aerobic, Verwendung von Sauerstoff für die Atmung, oder anaerob, Nutzung kombiniert werden Formen des Sauerstoffs wie Nitrat oder Sulfat, zum aufatmen. Manche Bakterien können Sauerstoff oder kombinierte Formen von Sauerstoff und sind bekannt als fakultative Anaerobier.

1. Vorbereitung des Bodens Verdünnungen

Um den Vorgang zu starten, 10 g Bodenprobe Abwiegen und 95 mL entionisiertem Wasser hinzufügen. Die Suspension gut schütteln, und als "A" zu kennzeichnen.
Bevor der Boden absetzt, 1 mL der Suspension mit einer sterilen Pipette entfernen und überträgt es auf 9 mL deionisiertes Wasser leer. Vortex gründlich, und Label als "B".
Diese Verdünnungsschritt dreimal wiederholen, jeweils mit 1 mL der vorherigen Suspension und eine 9-mL entionisi...

Eine 10-g-Probe des Bodens mit einem Feuchtigkeitsgehalt von 20 % auf einer trockenen Gewicht-Basis ist für tragfähige kultivierbarer Bakterien über Verdünnung und Galvanik Techniken analysiert. Die Verdünnungen erfolgten in Tabelle 1dargestellt. 1 mL der Lösung E ist Gießen-plattiert auf einem geeigneten Medium und führt zu 200 Bakterienkolonien.

Equation 1

Aber für 10 g für feuchten ...

Es gibt zwei grundlegende Anwendungen der Verdünnung und Beschichtung von Bodenbakterien. Die erste Anwendung ist die Aufzählung der kultivierbarer Bakterien innerhalb eines bestimmten Bodens. Die Quantifizierung der Anzahl der Bodenbakterien gibt Aufschluss über Bodengesundheit. Zum Beispiel, wenn es gibt 10⁶ bis 10⁸ kultivierbarer Bakterien pro Gramm Boden, würde dies als eine gesunde Anzahl. A Nummer weniger als 10⁶ pro Gramm zeigt ärmeren Bodengesundheit, die möglicherweise wege...

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