JoVE Logo
Faculty Resource Center

Sign In

0:00

Overview

1:25

Principles of Culturing and Enumerating Soil Bacteria

3:33

Preparation of Soil Dilutions

4:29

Making Spread Plates for Bacterial Culture

6:20

Bacterial and Actinomycetes Counts

7:09

Isolation of Pure Cultures

8:41

Applications

10:31

Summary

פולחן ופירום חיידקים מדגימות קרקע

מקור: מעבדות של ד"ר איאן פפר וד"ר צ'ארלס גרבה - אוניברסיטת אריזונה
מפגינים: בראדלי שמיץ ולואיזה איקנר

קרקעות פני השטח הן תערובת הטרוגנית של חלקיקים אנאורגניים ואורגניים המאחדים יחד ליצירת אגרגטים משניים. בתוך ובין האגרגטים יש חללים או נקבוביות המכילים חזותית הן אוויר והן מים. תנאים אלה יוצרים מערכת אקולוגית אידיאלית לחיידקים, כך שכל הקרקעות מכילות אוכלוסיות עצומות של חיידקים, בדרך כלל מעל מיליון לגרם של אדמה.

חיידקים הם המיקרואורגניזמים הפשוטים ביותר, הידועים בשם פרוקריוטים. בתוך קבוצה פרוקריוטית זו, ישנם חיידקים חוטיים המכונים actinomycetes. Actinomycetes הם למעשה חיידקים, אבל הם נחשבים לעתים קרובות קבוצה ייחודית בתוך הסיווג של חיידקים בגלל המבנה שלהם חוטים, אשר מורכב תאים מרובים תלויים יחד כדי ליצור hyphae. ניסוי זה משתמש במדיה מקרה גליצריל לבחור עבור מושבות actinomycete, במהלך דילול ו ציפוי. בדרך כלל, actinomycetes הם כ -10% מכלל אוכלוסיית החיידקים. חיידקים ואקטינומיצטים נמצאים בכל סביבה על פני כדור הארץ, אבל השפע והמגוון של חיידקים אלה באדמה הוא שאין שני לו. חיידקים אלה חיוניים גם לחיי אדם ומשפיעים על מה שאנשים אוכלים, שותים, נושמים או נוגעים בו. בנוסף, ישנם מינים חיידקיים שיכולים להדביק אנשים ולגרום למחלות, ויש חיידקים שיכולים לייצר מוצרים טבעיים המסוגלים לרפא אנשים. Actinomycetes חשובים במיוחד לייצור אנטיביוטיקה, כגון סטרפטומיצין. חיידקים חיוניים לרכיבה על אופניים מזינים, צמיחת צמחים והשפלה של מזהמים אורגניים.

חיידקים מגוונים מאוד מבחינת מספר המינים שניתן למצוא בקרקע, בין היתר משום שהם מגוונים מבחינה פיזיולוגית ומטבולית. חיידקים יכולים להיות הטרוטרופיים, כלומר הם משתמשים בתרכובות אורגניות, כגון גלוקוז, למזון ואנרגיה, או אוטוטרופי, כלומר הם משתמשים בתרכובות אנאורגניות, כגון גופרית בסיסית, למזון ואנרגיה. הם יכולים גם להיות אירוביים, ניצול חמצן לנשימה, או אנאירובי, ניצול צורות משולבות של חמצן, כגון חנקות או גופרתי, כדי להנשימה. חיידקים מסוימים יכולים להשתמש בחמצן או בצורות משולבות של חמצן וידועים בשם אנארובים פקולטיביים.

1. הכנת דילול קרקע

  1. כדי להתחיל את ההליך, לשקול 10 גרם של דגימת קרקע ולהוסיף 95 מ"ל של מים deionized. לנער את ההשעיה היטב, ולתייג כמו "A".
  2. לפני שהאדמה מתיישבת, להסיר 1 מ"ל של ההשעיה עם pipette סטרילי ולהעביר אותו מים deionized 9 מ"ל ריק. מערבולת ביסודיות, ולתייג כמו "B".
  3. חזור על שלב דילול זה ש?...

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

דגימה של 10 גרם של אדמה עם תכולת לחות של 20% על בסיס משקל יבש מנותחת עבור חיידקים קיימא culturable באמצעות טכניקות דילול ו ציפוי. הדילול נעשה כפי שמוצג בטבלה 1. 1 מ"ל של פתרון E הוא שפך מצופה על מדיום מתאים ותוצאה 200 מושבות חיידקים.

Equation 1

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

ישנם שני יישומים בסיסיים של דילול ו ציפוי של חיידקי קרקע. היישום הראשון הוא הספירה של חיידקים culturable בתוך אדמה מסוימת. כימות מספר חיידקי הקרקע נותן אינדיקציה לבריאות הקרקע. לדוגמה, אם יש 106 עד 108 חיידקים culturable נוכחים לכל גרם של אדמה, זה ייחשב מספר בריא. מספר קטן מ 106 לגרם מצבי?...

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Explore More Videos

Culturing
JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved