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Principles of Bacterial Growth Curve Analysis

3:46

Collection of Bacterial Culture Aliquots

5:09

Serial Dilution Plating to Quantify Bacteria

7:19

Counting Colonies and Calculating Mean Generation Time

9:31

Applications

11:50

Summary

Analyse der bakteriellen Wachstumskurve und ihre Umweltanwendungen

Quelle: Labors von Dr. Ian Pfeffer und Dr. Charles Gerba - Arizona University
Demonstrierende Autor: Luisa Ikner

Bakterien gehören zu den am häufigsten vorkommenden Lebensformen auf der Erde. Sie sind in jedem Ökosystem gefunden und sind von entscheidender Bedeutung für den Alltag. Zum Beispiel Bakterien beeinflussen, was die Leute Essen, trinken und atmen, und es gibt tatsächlich mehr bakterielle Zellen im Körper einer Person als Säugerzellen. Aufgrund der Bedeutung von Bakterien ist es vorzuziehen, bestimmte Arten von Bakterien im Labor zu untersuchen. Dazu werden Bakterien unter kontrollierten Bedingungen angebaut, in Reinkultur, was bedeutet, dass nur eine Art von Bakterium erwogen wird. Bakterien wachsen schnell in Reinkultur, und Zellzahlen in kurzer Zeit dramatisch zunehmen. Durch die Messung der Rate der Zellpopulation zu erhöhen, im Laufe der Zeit eine "Wachstumskurve" entwickelt werden. Dies ist wichtig, wenn mit dem Ziel, nutzen oder impfen bekannte Nummern des bakteriellen Isolats, zum Beispiel um Pflanzenwachstum zu verbessern, die biologischen Abbau giftiger organischer Stoffe oder Antibiotika oder andere natürliche Produkte im industriellen Maßstab zu produzieren.

1. Erhebung der Bakterienkultur Aliquote

  1. Impfen Sie einen Tag vor der Abholung von Wachstum Zeitpunkten 20 mL Trypticase-Soja Brühe (TSB) Medium in eine 50-mL-Flasche mit E. Coli.
  2. Inkubation über Nacht bei 27 ° C. Diese relativ langen Inkubationszeit führt zu einer stationären Phase Bevölkerung von Wildtyp E. Coli von ca. 109 KBE/mL.
  3. Am nächsten Tag verwenden Sie 100 µL der vorbereiteten Kultur 250 mL TSB (in einen 500-mL-Kolben) zu impfen. Mischen Sie ...

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Im Anschluss an eine serielle Verdünnung plating-Experiment wurde folgenden Daten erhalten. Zu Beginn des exponentiellen Wachstums bezeichnet hier als Zeitpunkt t = 0, die Ausgangskonzentration von Bakterienzellen ist 1.000 KBE/mL. Zum Zeitpunkt t = 6 h, die Konzentration der Zellen ist 16.000 KBE/mL.

Nun, X = 2n X X0

Wo: X0 = Anfangskonzentration der Zellen = 1.000 KBE/mL
X = Konzentration der Zellen nach der Zeit t = 1.

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Kenntnisse von Bakterienwachstum Kinetik und bakterielle Zahlen in einem Nährmedium ist aus einer Forschungs- und kommerzieller Sicht wichtig. In der Forschung ist es oft wichtig zu wissen, die Anzahl der Bakterien in einer Probe, also Experiments kann, repliziert werden wenn nötig, mit den exakten gleichen Zahlen. Zum Beispiel während der Experimente in denen bakterielle Impfkulturen auf einem Grundstück von Boden, ein Minimum von 104 KBE pro Gramm Boden um den gewünschten Effekt, wie verstärkten Abbau ...

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