Source : Laboratoire de Jeff Sanoussi - University of Massachusetts Amherst

Le produit d’une extraction par solvant organique, un extrait de lipides totaux (TLE), est souvent un mélange complexe de centaines, voire des milliers de différents composés. Le chercheur est souvent seulement intéressé par une poignée de composés ou, si vous êtes intéressé dans un grand nombre, peut avoir besoin éliminer les constituants indésirables « in the way » ou conjointement à élution. Par exemple, les concentrations de composés dans un échantillon sont souvent déterminées sur un chromatographe en phase gazeuse couplée à un détecteur à ionisation de flamme (GC-FID), parce que la relation entre la réponse de la FID (en pA) et la quantité de composé présent dans un échantillon (par exemple, ng/µL) est linéaire et sensible. La portion de GC de l’instrument sépare les différents composés dans un échantillon basé sur leur point d’ébullition, la structure chimique et l’affinité avec une phase solide qui peut changer selon la demande. Il en résulte un chromatogramme (Figure 1), montrant la séparation des constituants chimiques différents dans le temps, ainsi que leur concentration relative (calculée comme l’aire sous la courbe). Cependant, parfois plus d’un composé élué au large de la GC à la fois (Figure 1). Dans ce cas, purification de l’échantillon est nécessaire avant les composés peuvent être quantifiées en toute confiance.

Figure 1. Un chromatogramme montrant la séparation des constituants chimiques différents dans le temps et de leur concentration relative (aire sous la courbe). Pics de co élution et séparés sont indiqués.