JoVE Logo

Sign In

המרה של חומצת שומן מתיל אסטרים על ידי Saponification עבור Uk '37 פליאותרמיה

Overview

מקור: המעבדה של ג'ף סלקופ - אוניברסיטת מסצ'וסטס אמהרסט

המוצר של מיצוי ממס אורגני, תמצית שומנים מוחלטת (TLE), הוא לעתים קרובות תערובת מורכבת של מאות, אם לא אלפים, של תרכובות שונות. החוקר מעוניין לעתים קרובות רק קומץ של תרכובות או, אם מעוניין רבים, ייתכן שיהיה צורך להסיר מרכיבים לא רצויים כי הם "בדרך" או שיתוף פעולה. לדוגמה, הריכוזים של תרכובות בודדות במדגם נקבעים לעתים קרובות על כרומטוגרפיה גז בשילוב גלאי מייננות להבה (GC-FID), כי הקשר בין תגובת FID (ב- pA) לבין כמות המתחם במדגם (למשל,ng / μL) הוא ליניארי ורגיש. החלק GC של המכשיר מפריד תרכובות שונות במדגם המבוסס על נקודת הרתיחה שלהם, מבנה כימי, זיקה עם שלב מוצק שיכול להשתנות בהתאם ליישום. התוצאה היא כרומטוגרמה(Figure 1), המציגה את ההפרדה בין מרכיבים כימיים שונים בזמן, כמו גם את הריכוז היחסי שלהם (המחושב כאזור שמתחת לעקומה). עם זאת, לפעמים יותר ממתחם אחד חומק את GC בכל פעם(תאנהure 1). במקרה זה, טיהור מדגם נדרש לפני תרכובות ניתן לכמת בביטחון.
 

Figure 1
איור 1. כרומטוגרמה המציגה את ההפרדה בין מרכיבים כימיים שונים לאורך זמן ואת הריכוז היחסי שלהם (שטח מתחת לעקומה). פסגות דו-שלות ומופרדות מוצגות.

Procedure

1. התקנה והכנת חומרים

  1. להשיג תמצית שומנים הכוללת (TLE) באמצעות שיטת מיצוי ממס (Sonication, Soxhlet, או מיצוי ממס מואץ (ASE)).
  2. הכן פתרון של 2 N KOH ב 5% H2O במתנול.
    1. KOH ומתנול ניתן לרכוש מקמעונאים כימיים. כימיקלים אלה צריכים להיות טהורים וללא פחמימנים.
      1. המסה הטוחנת של KOH היא ~ 56 ...

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Results

טיהור זה מייצר TLE ללא אסטרים שעשויים להיות שיתוף פעולה עם alkenones. עם זאת, הטיהור יצר חומצות קרבוקסיליות, אשר לא ניתן להזריק על מכשירים המשמשים בדרך כלל כדי לנתח דגימות עבור ריכוזי אלקנון בגלל התנודתיות הנמוכה שלהם. לדוגמה, נקודת הרתיחה של הקסאן, פחמימן 6 פחמן, הוא 68 °C (68 °F), אבל נקודת הרתיחה של החומצה שלה (?...

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Application and Summary

כפי שהוזכר קודם לכן, saponification משמש בדרך כלל במעבדות גיאוכימיה אורגנית כדי להסיר אסטרים מתיל חומצות שומן (FAMEs) של אלקנונים, הנקראים alkenoates, אשר co-elute עם alkenones על כרומטוגרפים גז(איורure 1). Saponification משמש גם "חינם" חומצות שומן "מחויב" משקעים או macromolecules. ההשפלה והשימור של חומר אורגני וס?...

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Tags

Skip to...

0:00

Overview

1:03

Principles of Saponification

2:38

Hydrolyzing Fatty Acid Methyl Esters

4:00

Separating the Organic and Aqueous Phases

5:36

Applications

8:03

Summary

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved