JoVE Logo

Sign In

Conversión de ésteres metílicos de ácidos grasos por saponificación para Uk'Paleothermometry37

Overview

Fuente: Laboratorio de Jeff Salacup - Universidad de Massachusetts Amherst

El producto de una extracción con disolvente orgánico, un extracto total de lípidos (TLE), es a menudo una mezcla compleja de cientos, si no miles, de diferentes compuestos. El investigador a menudo sólo está interesado en un puñado de compuestos o, si está interesado en muchos, puede necesitar eliminar a componentes no deseados que se encuentran "en el camino" o co liberador. Por ejemplo, las concentraciones de compuestos individuales en una muestra se determinan a menudo en un cromatógrafo de gases acoplado a un detector de ionización de llama (GC-FID), porque la relación entre la respuesta de la FID (en pA) y la cantidad de compuesto en una muestra (p. ej., ng/μL) es lineal y sensible. La porción de GC del instrumento separa diferentes compuestos en una muestra basada en su punto de ebullición, estructura química y afinidad con una fase sólida que puede cambiar según la aplicación. El resultado es un cromatograma (Figure 1), mostrando la separación de componentes químicos diferentes en tiempo, así como su concentración relativa (calculado como el área bajo la curva). Sin embargo, a veces más de uno compuesto elutes de la GC en un tiempo (Figure 1). En este caso, purificación de las muestras es necesario antes de compuestos pueden ser cuantificados con confianza.

Figure 1
Figura 1. Un cromatograma que muestra la separación de componentes químicos diferentes en el tiempo y su concentración relativa (área bajo la curva). Se muestran picos de co liberador y separados.

Procedure

1. configuración y preparación de materiales

  1. Obtener un total de lípidos extracto (TLE) utilizando un método de extracción por solvente (sonicación, Soxhlet o extracción acelerada de disolvente (ASE)).
  2. Preparar una solución de KOH 2 N 5% H2O metanol.
    1. KOH y metanol pueden adquirirse en tiendas de productos químicos. Estos productos químicos deben ser puro y libre de hidrocarburos.
      1. La masa molar de KOH es 56 uma produciendo 1 mol de ...

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Results

Esta purificación produce un ELT de ésteres que pueden ser co liberador con el alkenones. Sin embargo, la purificación produce ácidos carboxílicos, que no puede ser inyectados en instrumentos comúnmente utilizados para analizar las muestras para las concentraciones de alkenone debido a su baja volatilidad. Por ejemplo, el punto de ebullición del hexano, un hidrocarburo de 6 carbonos, es 68 ° c, pero el punto de ebullición de su ácido hexanoico es 205 ° c. Más marcadores biológicos susceptibles de GC tienen de 20 a 35 átomos de ...

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Application and Summary

Como se mencionó anteriormente, saponificación se utiliza comúnmente en los laboratorios de geoquímica orgánica para eliminar ésteres metílicos del ácido graso (famas) de alkenones, llamado alkenoates, que co fin de eluir con alkenones en Cromatógrafos de gases (Figure 1). Saponificación se utiliza también para ácidos grasos "libres" "obligados" a los sedimentos o macromoléculas. La degradación y la preservación de materia orgánica en los sedimentos y consiste en la remoció...

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Tags
Valor vac otema

Skip to...

0:00

Overview

1:03

Principles of Saponification

2:38

Hydrolyzing Fatty Acid Methyl Esters

4:00

Separating the Organic and Aqueous Phases

5:36

Applications

8:03

Summary

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved